ALPCO-前白蛋白(小鼠)ELISA, 96孔检测原理&结果计算

ALPCO前白蛋白ELISA是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法（ELISA），用于测量小鼠血清和血浆样本中的前白蛋白。仅供研究使用。不用于诊断程序。

艾美捷前白蛋白(小鼠)ELISA, 96孔（ALP-41-PALMS-E01）检测原理：

在该测定中，样品中存在的前白蛋白与吸附在聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗前白蛋白抗体反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）结合的抗前白蛋白抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的前白蛋白形成复合物。在另一个洗涤步骤之后，通过添加显色底物3,3'，5,5'-四甲基联苯胺（TMB）来测定与免疫吸附结合的酶。结合酶的量与被测样品中前白蛋白的浓度直接相关；因此，450nm处的吸光度是测试样品中前白蛋白浓度的量度。测试样品中前白蛋白的量可以从标准品构建的标准曲线中插值，并根据样品稀释进行校正。

前白蛋白(小鼠)ELISA, 96孔试剂盒组分：

试剂盒及其组分的有效期在盒标签上标明。如果按照本试剂盒协议插入存储和使用，所有组分在有效期前都是稳定的。

程序局限性：

当按照试剂盒说明书中的信息完全理解并遵循良好的实验室操作实践进行测定程序时，将获得可靠和可重复的结果。可能影响测定性能的因素包括适当的仪器功能、玻璃器皿的清洁度、蒸馏水或去离子水的质量、试剂和样本移液的准确性、洗涤技术、孵育时间或温度。不要将不同批次或来源的试剂混合或替换。

样本收集和处理：

所有血液成分和生物材料应被视为潜在的危险物质。在处理和处置时遵循通用预防措施。如果血液样本出现凝血、严重溶血、脂血，或者对样本的完整性有疑虑，请做好记录并谨慎解释结果。下面列出的样本收集和储存条件是作为一般指导。尚未评估样本的稳定性。

- 血清样本 - 应通过静脉穿刺收集血液。血液凝固后，通过离心分离血清。取出血清立即进行测定或分装后将样本储存在-80°C（最好）或-20°C。避免重复冻融循环。

- 血浆样本 - 应将血液收集到含有抗凝剂的容器中，然后进行离心。立即进行测定或分装后将样本储存在-80°C（最好）或-20°C。避免重复冻融循环。

- 已知干扰物质 - 浓度高于0.1%的叠氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。

结果计算：

1. 从每个孔的测试值中减去平均背景值（标准零的平均吸光度读数）。

2. 对每个标准的平均重复读数取平均值，并使用这些结果构建标准曲线。通过使用能够生成四参数逻辑曲线拟合的计算机软件来减少数据，构建标准曲线。也可以使用二阶多项式（二次）或其他曲线拟合；然而，它们对数据的拟合将不够精确。

3. 从标准曲线中插值测试样本值。校正稀释因子，以得出原始样本中的前白蛋白浓度。

附录A - 参考血清信息：

本试剂盒包含一瓶参考血清。请参阅随附的产品概况表以获取特定批次的信息。请注意以下事项：

1. 收到参考血清后应将其冷冻。如果储存得当，它在有效期前都是稳定的。

2. 应适当稀释参考血清，以适应标准范围曲线。

3. 有关稀释样本的说明，请参考协议中的“样本稀释”部分。

4. 在移液样本（程序部分）时，也应双重移液参考血清。