IgG检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法(ELISA),用于检测猪血浆和血清样本中免疫球蛋白G(IgG)的定量测定。For仅供研究使用。不用于诊断程序。
作为ALPCO在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品羊IgG ELISA试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
羊IgG ELISA试剂盒 | ALP-41-IGGPO-E01 | 查看 |
羊IgG ELISA试剂盒检测原理:
双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在此检测中,样品中的IgG与已吸附在聚苯乙烯微量滴定板表面的抗IgG抗体反应。在通过洗涤去除未结合的蛋白质后,加入与辣根过氧化物酶(HRP)结合的抗IgG抗体。这些酶标记的抗体与先前结合的IgG形成复合物。在另一个洗涤步骤之后,通过加入显色底物3,3',5,5'-四甲基苯胺(TMB)来测定结合到免疫吸附剂上的酶的活性。结合的酶的量与所测试样品中IgG的浓度成正比;因此,在450 nm处的吸光度可以作为测试样品中IgG浓度的测量。测试样品中IgG的量可以通过从标准曲线中插值得到,该标准曲线是通过标准品构建的,并已根据样品稀释进行校正。
所需但未提供的材料
精密移液器(2 ?L 至 100 ?L),用于稀释和分配
试管
喷瓶或微量滴定板洗涤器/吸取器
蒸馏水或去离子水
微量滴定板读数仪
各种玻璃器皿,用于准备试剂和缓冲溶液
定时器
抗凝剂(用于血浆样品收集)
离心机(用于样品收集)
样品收集和处理
所有血液成分和生物材料应视为潜在危险物质进行处理。在处理和处置时遵循通用预防措施。如果血样出现凝块、明显溶血、乳糜血,或者样品完整性有疑虑,请做好记录并谨慎解读结果。以下列出的样品收集和存储条件作为一般指南,样品稳定性尚未评估。
血清样品:血液应通过静脉穿刺采集。在凝块形成后,通过离心将血清从细胞中分离。去除血清后立即测定,或分装并将样品存储在-80°C(优选)或-20°C。避免反复冻融循环。
血浆样品:血液应收集到含抗凝剂的容器中,然后进行离心。立即测定,或分装并将样品存储在-80°C(优选)或-20°C。避免反复冻融循环。
已知干扰物质:在浓度高于0.1%时,叠氮化钠和硫柳汞会抑制酶反应。
样品稀释
该检测要求在使用前对每个测试样品进行稀释。每次进行检测时,所有样品应进行重复测定。推荐的稀释倍数仅供参考,稀释应基于未知样品的预期浓度,以确保稀释后的样品在标准曲线的动态范围内。如果不确定样品水平,建议在运行整个板之前,对一两个代表样品进行系列稀释。
血清和血浆样品:推荐的起始稀释倍数为1:10,000。要准备1:10,000的样品稀释液,将5 ?L样品转移到495 ?L的1X稀释液中,这样得到1:100的稀释液。接着,将1:100的稀释液进一步稀释,将5 ?L转移到495 ?L的1X稀释液中,这样得到1:10,000的稀释液。每个阶段均需充分混合。
试剂准备
使用前,将所有试剂升至室温(16°C至25°C)。
稀释剂浓缩液:提供的稀释液为5X浓缩液,需用蒸馏水或去离子水按1:5稀释(1份缓冲液浓缩液,4份去离子水)。
洗涤液浓缩液:提供的洗涤液为20X浓缩液,需用蒸馏水或去离子水按1:20稀释(1份缓冲液浓缩液,19份去离子水)。在低储存温度下,浓缩液中可能会出现晶体。在稀释前,将浓缩液加热至30-35°C可溶解晶体。
酶-抗体偶联物:通过将10 ?L酶-抗体偶联物加入990 ?L的1X稀释液中,计算每个微量滴定板测试条所需的工作偶联液体积。在使用前立即稀释,并避免光照。轻轻均匀混合,避免起泡。
预涂ELISA微板:按照提供的状态即可使用。撕开铝箔袋,从袋中取出微板。将所有不用于检测的试条和孔再次放回袋中,并与干燥剂一起重新密封。
猪IgG校准品:根据批次特定的分析证书进行准备。
ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。
作为ALPCO在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。
微信扫码在线客服