该IgG检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法(ELISA),用于测定小鼠血清和血浆样本中的IgG。仅供研究使用。不用于诊断程序。
作为ALPCO在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品IgG(小鼠)ELISA, 96孔。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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IgG(小鼠)ELISA, 96孔 | ALP-41-IGGMS-E01 | 查看 |
IgG(小鼠)ELISA, 96孔检测原理:
双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在此检测中,样品中的IgG与已吸附在聚苯乙烯微量滴定板表面的抗IgG抗体反应。在通过洗涤去除未结合的蛋白质后,加入与辣根过氧化物酶(HRP)结合的抗IgG抗体。这些酶标记的抗体与先前结合的IgG形成复合物。在另一个洗涤步骤之后,通过加入显色底物3,3',5,5'-四甲基苯胺(TMB)来测定结合到免疫吸附剂上的酶的活性。结合的酶的量与所测试样品中IgG的浓度成正比;因此,在450 nm处的吸光度可以作为测试样品中IgG浓度的测量。测试样品中IgG的量可以通过从标准曲线中插值得到,该标准曲线是通过标准品构建的,并已根据样品稀释进行校正。
试剂准备
使用前,将所有试剂升至室温(16°C至25°C)。
稀释剂浓缩液 - 提供的稀释液为5X浓缩液,需用蒸馏水或去离子水按1:5稀释(1份缓冲液浓缩液,4份去离子水)。
洗涤液浓缩液 - 提供的洗涤液为20X浓缩液,需用蒸馏水或去离子水按1:20稀释(1份缓冲液浓缩液,19份去离子水)。在低储存温度下,浓缩液中出现晶体是常见现象。在稀释前,将浓缩液加热至30-35°C可溶解晶体。
酶-抗体偶联物 - 通过将10 ?l酶-抗体偶联物加入990 ?l的1X稀释液中,计算每个微量滴定板测试条所需的1X工作偶联液体积。在使用前立即稀释,并避免光照。轻轻均匀混合,避免起泡。
预涂ELISA微板 - 按照提供的状态即可使用。撕开铝箔袋,取出微板。将所有不使用的试条和孔再次放回袋中,密封好并放入干燥剂。
小鼠IgG校准品 - 根据批次特定的分析证书进行准备。
所需但未提供的材料
精密移液器(2 ?l至100 ?l)用于稀释和分配
试管
喷瓶或微量滴定板洗涤器/吸取器
蒸馏水或去离子水
微量滴定板读数仪
各种玻璃器皿用于准备试剂和缓冲溶液
定时器
离心机用于样品收集
抗凝剂(用于收集血浆样品)
样品收集和处理
所有血液成分和生物材料应视为潜在危险物质进行处理。在处理和处置时遵循通用预防措施。如果血样出现凝块、明显溶血、乳糜血,或样品完整性有疑虑,请做记录并谨慎解读结果。
以下列出的样品收集和存储条件作为一般指南。样品稳定性尚未评估。
血清样品 - 血液应通过静脉穿刺采集。血液凝固后,需通过离心将血清从细胞中分离。去除血清后立即测定或分装并将样品存储在-80°C(优选)或-20°C。避免反复冻融循环。
血浆样品 - 血液应收集到含抗凝剂的容器中,然后进行离心。立即测定或分装并将样品存储在-80°C(优选)或-20°C。避免反复冻融循环。
已知干扰物质 - 在浓度高于0.1%时,叠氮化钠和硫柳汞会抑制酶反应。
ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。
作为ALPCO在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。
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