ALPCO 马IgG ELISA试剂盒的样品收集和处理方法

IgG检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法（ELISA），用于定量马血浆和血清样本中免疫球蛋白G（IgG）的测定。用于研究用途只有。不用于诊断程序。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品马IgG ELISA试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

马IgG ELISA试剂盒检测原理：

双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在该检测方法中，样本中的IgG与吸附在聚苯乙烯微量滴定板表面的抗IgG抗体发生反应。洗涤后去除未结合的蛋白质，随后加入与辣根过氧化物酶（HRP）偶联的抗IgG抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的IgG形成复合物。再次洗涤后，通过加入色原底物3,3’,5,5’-四甲基联苯胺（TMB）来检测结合在免疫吸附剂上的酶。结合的酶量与样本中IgG的浓度成正比；因此，在450 nm处的吸光度反映了测试样本中IgG的浓度。测试样本中IgG的量可以通过从标准曲线中插值得到，该标准曲线由标准品构建并根据样本稀释度进行校正。

需要但未提供的材料

? 精密移液管（2?L至1000?L）用于制备和分配稀释液

? 试管

? 喷壶或微孔板洗涤器/吸液器

? 蒸馏水或去离子水

? 微孔板读数仪

? 各种玻璃器皿用于制备试剂和缓冲溶液

? 计时器

? 抗凝剂（用于血浆样品收集）

? 离心机

样品收集和处理

所有血液成分和生物材料都应视为潜在的危险物质。处理和处置时应遵循通用预防措施。

如果血样凝块、明显溶血、混浊或样品完整性值得担忧，请做好记录，并谨慎解读结果。

以下列出的样品采集和存储条件仅供参考。样品稳定性尚未评估。

? 血清样品：应通过静脉采血收集血液。凝固后应通过离心将血清与细胞分离。立即进行检测或分装并存储样品在-80°C（首选）或-20°C。避免重复冻融循环。

? 血浆样品：血液应收集到带有抗凝剂的容器中然后离心。立即进行检测或分装并存储样本在-80°C（首选）或-20°C。避免重复冻融循环。

? 已知干扰物质：浓度高于0.1%的偶啶和硫黄汞均会抑制酶反应。

样品稀释

该测定要求每个测试样品在使用前必须稀释。每次进行测定时，所有样品均应重复检测。推荐的稀释仅供参考。稀释应基于未知样品的预期浓度，以使稀释样品在标准曲线的动态范围内。如果不确定样品值，建议先进行代表性样品的串联稀释检测，然后再运行整个孔板。

? 血清和血浆样品-推荐的起始稀释为1:200,000。要准备1:200,000的样品稀释，将2?L样品转移至1998?L的1倍稀释液中。这样，您获得1:1,000的稀释。然后通过将2?L转移到398?L的1倍稀释液中进行稀释。这样，您获得1:200,000的稀释。每个阶段均要充分混合。

试剂制备

? 在使用前将所有试剂室温（16°C至25°C）恢复。

? 稀释液浓缩液-提供的稀释液溶液为5倍浓缩液，必须与蒸馏水或去离子水按1:5稀释（1部分缓冲液浓缩物，4部分dH2O）。

? 洗涤液浓缩液-提供的洗涤液是20倍浓缩液，必须与蒸馏水或去离子水按1:20稀释（1部分缓冲液浓缩物，19部分dH2O）。当存储温度较低时，浓缩物中可能出现结晶。未稀释前将浓缩物加热至30-35°C，可溶解结晶。

? 酶-抗体复合物-通过将10?L酶-抗体共轭物加入到990?L 1倍稀释液中为每个微孔板测试带计算所需的工作共轭溶液。立即稀释使用，并远离光线。均匀但轻柔地混合。避免起泡。

? 预包被ELISA微孔板-如供应的那样随用随用。解封箔袋并取出板。取出不会在测试中使用的所有条和孔，放回到袋子中重新密封以及干燥剂。

? 马IgG校准物-按照特定批次的分析证书准备。

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。