本犬类IgG检测试剂盒是一款高灵敏度的双位点酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒,专门用于犬血清和血浆样本中IgG的测定。仅供研究使用,不适用于诊断或治疗程序。仅限体外使用。
作为ALPCO在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品IgG(犬)ELISA, 96孔。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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IgG(犬)ELISA, 96孔 | ALP-41-IGGCA-E01 | 查看 |
IgG(犬)ELISA, 96孔检测原理:
双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在该检测中,样本中的IgG与吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗IgG抗体发生反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后,加入与辣根过氧化物酶(HRP)偶联的抗IgG抗体。这些酶标抗体与之前结合的IgG形成复合物。再次洗涤后,通过添加色原底物3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)来检测结合的酶。结合酶的量与被测样本中IgG的浓度成正比;因此,在450 nm处的吸光度反映了测试样本中IgG的浓度。通过从标准曲线中插值并校正样本稀释度,可以确定测试样本中IgG的量。
试剂准备
使用前,将所有试剂置于室温(16°C至25°C)。
? 稀释液浓缩液
提供的稀释液是5X浓缩液,必须用蒸馏水或去离子水按1:5稀释(1份缓冲液浓缩液,4份dH2O)。
? 洗涤液浓缩液
提供的洗涤液是20X浓缩液,必须用蒸馏水或去离子水按1:20稀释(1份缓冲液浓缩液,19份dH2O)。浓缩液在低温储存时形成结晶是常见的现象。在稀释前将浓缩液加热至30-35°C可以溶解结晶。
? 酶标抗体
根据每个微孔板测试条所需的工作液量,将10 ?L酶标抗体加入990 ?L 1X稀释液中。使用前立即稀释并避光。均匀但轻柔地混合,避免起泡。
? 预包被ELISA微孔板
开袋即用。打开铝箔袋,取出微孔板。移除不用于检测的条带和孔,放回袋中并重新密封,同时放入干燥剂。
? 犬IgG校准品
根据批次特定的分析证书进行准备。
储存与稳定性
包装的有效期标示在盒子上。
样本采集与处理
所有血液成分和生物材料应视为潜在危险品。处理和处置时应遵循普遍预防措施。
如果血液样本凝固、严重溶血、脂血或样本完整性存疑,请记录并谨慎解释结果。
以下样本采集和储存条件作为宽泛的指导。样本稳定性未评估。
? 血清样本
应通过静脉穿刺采集血液。血清应在凝固后通过离心分离细胞。立即检测或分装并储存样本于-80°C(首选)或-20°C。避免反复冻融。
? 血浆样本
血液应收集到含有抗凝剂的容器中,然后离心。立即检测或分装并储存样本于-80°C(首选)或-20°C。避免反复冻融。
? 已知干扰物质
浓度高于0.1%的叠氮化钠和硫柳汞会抑制酶反应。
需要但未提供的材料
? 精密移液器(2 ?L至100 ?L)用于稀释和分装
? 试管
? 喷雾瓶或微孔板洗涤器/吸液器
? 蒸馏水或去离子水
? 微孔板读数仪
? 用于试剂和缓冲液制备的各种玻璃器皿
? 计时器
? 样本采集用离心机
? 血浆样本采集用抗凝剂
ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。
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