IgG检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法(ELISA),用于检测牛血浆和血清样本中免疫球蛋白G(IgG)的定量测定。For仅供研究使用。不用于诊断程序
作为ALPCO在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品牛IgG(高特异性)ELISA试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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牛IgG(高特异性)ELISA试剂盒 | ALP-41-IGGBO-E01 | 查看 |
牛IgG(高特异性)ELISA试剂盒检测原理:
双抗体夹心ELISA的原理如图1所示。在该试验中样品中存在的IgG与吸附在表面的抗IgG抗体反应聚苯乙烯微量滴定孔。通过洗涤去除未结合的蛋白质后,抗IgG加入与辣根过氧化物酶(HRP)结合的抗体。这些酶被标记抗体与先前结合的IgG形成复合物。在另一个洗涤步骤之后通过添加显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺来测定结合酶(TMB)。结合酶的量与样品中IgG的浓度直接相关测试;因此,450nm处的吸光度是测试样品中IgG浓度的量度。测试样品中IgG的量可以从以下公式构建的标准曲线中插值标准品和样品稀释校正。
所需但未提供的材料
?用于制作和分配稀释液的精密移液管(2?L至1000?L)
?试管
?喷瓶或微量滴定器清洗/抽吸器
?蒸馏水或去离子水
?微量滴定板读数器
?用于制备试剂和缓冲溶液的各种玻璃器皿
?定时器
?抗凝剂(用于血浆样本采集)
?离心机
样品收集和处理
所有血液成分和生物材料都应作为潜在危险品进行处理。跟随处理和处置时的普遍预防措施。如果血液样本凝结、严重溶血、血脂或样本完整性不佳关注、记录并谨慎解释结果。
以下列出的样品收集和储存条件仅作为一般指南。样品稳定性尚未评估。
?血清样本:应通过静脉穿刺采集血液。血清应该是在凝块形成后通过离心与细胞分离。去除血清并测定立即或等分,并将样品储存在-80°C(最好)或-20°C下。避免重复冻融循环。
?血浆样本:应将血液收集到装有抗凝剂的容器中然后离心。立即进行检测或等分,并将样品储存在-80°C下(最好)或-20°C。避免反复冻融循环
?已知干扰物质:浓度高于0.1%的叠氮和硫柳汞抑制酶反应。
样品稀释
该分析要求每个测试样品在使用前都要稀释。所有样品都应进行化验每次进行测定时,一式两份。推荐的稀释液仅供参考。稀释应基于未知样品的预期浓度,以便稀释样品落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样本值,
在运行整个平板之前,用一个或两个代表性样品进行连续稀释的测定强烈推荐。
?血清和血浆样本——建议起始稀释度为1:400000。准备a1:400000稀释样品,将2?L样品转移到1998?L 1X稀释剂中。这就产生了1:1000稀释。接下来,通过将2?L转移到798?L 1X稀释剂中来稀释1:1000。这个产生1:400000稀释液。在每个阶段彻底混合。
试剂制备
?使用前,将所有试剂置于室温(16℃至25℃)。
?稀释剂浓缩液-提供的稀释剂溶液是20倍浓缩液,必须稀释1:20,用蒸馏水或去离子水(1份缓冲浓缩液,19份dH2O)洗涤。
?洗涤液浓缩液-提供的洗涤液是20倍浓缩液,必须用蒸馏水或去离子水(1份缓冲浓缩液、19份dH2O)以1:20稀释。当储存温度较低时,精矿中可能会出现晶体形成。变暖稀释前将浓缩物加热至30-35℃可以溶解晶体。
?酶抗体偶联物-计算所需量的工作偶联物溶液通过将10?L酶抗体偶联物添加到990?L的1X用于测试的每个测试条的稀释剂。使用前立即稀释并保护从光。混合均匀,但要轻柔。避免起泡。
?预涂ELISA微孔板-随附即用。拧开箔袋并取出从袋子里取出盘子。移除所有不用于分析的条带和孔,并放置放回袋子里,用干燥剂重新密封。
?牛IgG校准器——根据特定批次的分析证书制备。
ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。
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