IgA检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法(ELISA),用于测定大鼠血清和血浆样本中的IgA。
作为ALPCO在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品IgA(大鼠)ELISA试剂盒,96w。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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IgA(大鼠)ELISA试剂盒,96w | ALP-41-IGART-E01 | 查看 |
IgA(大鼠)ELISA试剂盒,96w检测原理:
双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)的原理如图1所示。在这种测定中,样本中的IgA与吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗IgA抗体发生反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后,加入与辣根过氧化物酶(HRP)偶联的抗IgA抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的IgA形成复合物。经过另一次洗涤步骤后,通过添加显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)来测定免疫吸附剂上结合的酶。结合酶的量与测试样本中IgA的浓度直接相关;因此,450纳米处的吸光度是测试样本中IgA浓度的量度。测试样本中IgA的量可以从标准曲线中插值得到,并根据样本稀释进行校正。
试剂(足够进行96次测定的量)
稀释液浓缩液(测定缓冲液)
一瓶含有50毫升5倍浓缩的稀释测定缓冲液。
洗涤液浓缩液
一瓶含有50毫升20倍浓缩的洗涤液。
酶-抗体结合物100倍
一瓶含有150微升亲和纯化的抗大鼠IgA抗体与辣根过氧化物酶结合的稳定缓冲液。
显色底物溶液
一瓶含有12毫升3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)和过氧化氢在柠檬酸缓冲液中,pH值为3.3。
终止液
一瓶含有12毫升0.3M硫酸。警告:避免与皮肤接触。
抗大鼠IgA ELISA微孔板
十二个可移动的八(8)孔微孔条,在微孔板架中。每个孔都涂有亲和纯化的抗大鼠IgA。
大鼠IgA校准液
一瓶含有冻干的大鼠IgA校准液。
仅限研究使用。
试剂准备
稀释液浓缩液
提供的稀释液是5倍浓缩液,必须用蒸馏水或去离子水(1份缓冲液浓缩液,4份dH2O)稀释1:5。
洗涤液浓缩液
提供的洗涤液是20倍浓缩液,必须用蒸馏水或去离子水(1份缓冲液浓缩液,19份dH2O)稀释1:20。浓缩液在储存温度低时结晶并不少见。稀释前将浓缩液加热至30-35°C可以溶解晶体。
酶-抗体结合物
通过向每个微孔板测试条添加10微升酶-抗体结合物到990微升1X稀释液中,计算每个微孔板测试条所需的工作结合物溶液量。均匀混合,但要轻柔。避免起泡。
显色底物溶液
按提供状态使用。
终止液
按提供状态使用。
抗大鼠IgA ELISA微孔板
按提供状态使用。打开微孔板袋,从袋中取出板。取出在测定中不会使用的所有条和孔,放回袋中并重新密封,连同干燥剂一起。
大鼠IgA校准液
向校准液中加入1.0毫升蒸馏水或去离子水,轻轻混合直至溶解。校准液现在浓度为50微克/毫升(如果打算将来使用,重组校准液应分装并冷冻)。标准品需要在使用前立即准备。每步之间混合良好。避免起泡。
储存和稳定性
包装的有效期标注在外箱标签上。
稀释液
5倍稀释液浓缩液在有效期前保持稳定。1倍工作溶液自配制之日起至少稳定一周。两种溶液都应储存在4-8°C。
洗涤液
20倍洗涤液浓缩液在有效期前保持稳定。1倍工作溶液自配制之日起至少稳定一周。两种溶液可以储存在室温(16-25°C)或4-8°C。
酶-抗体结合物
未稀释的辣根过氧化物酶抗IgA结合物应储存在4-8°C,并在使用前立即稀释。工作结合物溶液在黑暗处储存时稳定长达1小时。
显色底物溶液
底物溶液应储存在4-8°C,在有效期前保持稳定。
终止液
终止液应储存在4-8°C,在有效期前保持稳定。
抗大鼠IgA ELISA微孔板
抗大鼠IgA涂层孔在有效期前保持稳定,应储存在4-8°C的密封箔袋中,并放有干燥剂包。
大鼠IgA校准液
冻干的大鼠IgA校准液应储存在4°C或冷冻至重组。重组后的校准液应分装并冷冻储存(避免多次冻融循环)。工作标准溶液应在使用前立即准备。
ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。
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