ALPCO 血凝素(人)ELISA试剂盒在疾病诊断中的应用价值

Hemopexin试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法（ELISA），用于测量人血浆和血清中的血红蛋白。仅供研究使用。不适用于诊断程序。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品血凝素(人)ELISA试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

血凝素(人)ELISA试剂盒检测原理：

双抗体夹心酶联免疫吸附测定（ELISA）的原理在图1中表示。在这种测定中，样品中存在的血浆蛋白与已吸附到聚苯乙烯微孔板表面的抗血浆蛋白抗体反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）结合的抗血浆蛋白抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的血浆蛋白形成复合物。经过另一次洗涤步骤后，通过添加显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB），测定免疫吸附剂上结合的酶。结合的酶量与测试样品中血浆蛋白的浓度直接相关；因此，450纳米处的吸光度是测试样品中血浆蛋白浓度的量度。测试样品中血浆蛋白的量可以从标准曲线中插值得出，并根据样品稀释进行校正。

未提供的所需材料

? 精密移液器（2微升至1000微升），用于制备和分发稀释液

? 试管

? 微孔板洗涤器/抽吸器

? 蒸馏水或去离子水

? 微孔板读取器

? 用于制备试剂和缓冲溶液的各种玻璃器皿

? 计时器

样本收集和处理

所有血液成分和生物材料应视为潜在危险。

处理和处置时遵循通用预防措施。

如果血液样本出现凝固、严重溶血、脂血，或样本完整性受到质疑，请做记录并谨慎解释结果。

以下列出的样本收集和储存条件仅供参考。

尚未评估样本稳定性。

血清样本 - 应通过静脉穿刺收集血液。

血凝块形成后通过离心分离血清。

取出血清并立即进行测定或分装样本并储存于-80°C（最好）或-20°C。

避免反复冻融循环。

血浆样本 - 应将血液收集到含有抗凝剂的容器中，然后进行离心。

立即进行测定或分装样本并储存于-80°C（最好）或-20°C。

避免反复冻融循环。

已知干扰物质 - 浓度高于0.1%的氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。

样本稀释

测定要求在测试前对每个测试样本进行稀释。

每次进行测定时，所有样本都应以双份进行测定。

推荐的稀释只是建议。

稀释应基于未知样本的预期浓度，使稀释后的样本落在标准曲线的动态范围内。

如果不确定样本水平，在运行整个板之前，强烈建议对一个或两个代表性样本进行系列稀释。

? 血浆和血清样本 - 推荐的起始稀释为1:40,000。

要准备1:40,000的样本稀释，将5微升的样本转移到495微升的1倍稀释液中。

这给出1:100的稀释。

接下来，将2微升的1:100稀释样本转移到798微升的1倍稀释液中。

这产生1:40,000的样本稀释。

在每个阶段彻底混合。

试剂准备

? 稀释液浓缩液 - 提供的稀释液是5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1份缓冲液浓缩液，4份dH2O）稀释1:5。

? 洗涤液浓缩液 - 提供的洗涤液是20倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1份缓冲液浓缩液，19份dH2O）稀释1:20。

浓缩液在储存温度较低时可能会形成晶体。

在稀释前将浓缩液加热至30-35°C可以溶解晶体。

? 酶-抗体结合物 - 通过向每个微孔板测试条中添加10微升酶-抗体结合物到990微升1倍稀释液中，计算每个微孔板测试条所需的工作结合物溶液量。

使用前立即稀释，并避光保存。

均匀但轻柔地混合。

避免起泡。

? 预涂覆ELISA微孔板 - 按提供状态使用。

打开微孔板袋，从袋中取出板。

取出在测定中不会使用的所有的条和孔，放回袋中并重新密封，连同干燥剂。

? 人血浆蛋白校准液 - 根据批次特定的分析证书进行准备。

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。