急性期蛋白是感染、炎症后浓度增加的血浆蛋白或创伤。Tillet和Frances在人类中发现了第一个被识别的急性期蛋白19301年触珠蛋白(Hp)是一种异质性血浆蛋白,主要由肝脏合成。这个触珠蛋白单体由两条重链β链(40kD)和两条轻链α链组成,α1(9kD)和α2(16kD),它们是连接的二硫键。三种主要的触珠蛋白类型是:;Hp1-1是单体(98kD),Hp1-2在约200kD处是聚合物,Hp2-2在约400kD处是聚合物。这个急性组织损伤后24至48小时内,血清水平迅速上升,也迅速下降一旦刺激被移除。事实上,溶血性贫血患者的Hp水平会降低。Hp具有很高的亲和力血红蛋白(Hb)及其功能似乎是防止尿液中Hb的流失,从而导致流失铁。过去几年的研究表明,血浆或血清中Hp的定量可以为疾病的检测、预后和监测提供有价值的诊断信息,不仅限于人类,但伴侣动物和农场畜群也是如此。
作为ALPCO在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品Haptoglobin(人)ELISA(96孔)。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
Haptoglobin(人)ELISA(96孔) | ALP-41-HAPHU-E01 | 查看 |
Haptoglobin(人)ELISA(96孔)检测原理:
如图1所示,在这种测定中,样品中的触珠蛋白与已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗触珠蛋白抗体发生反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后,加入与辣根过氧化物酶(HRP)偶联的抗触珠蛋白抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的触珠蛋白形成复合物。经过另一次洗涤步骤后,通过添加显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)来测定与免疫吸附剂结合的酶。结合的酶量与测试样品中触珠蛋白的浓度成正比;因此,450纳米处的吸光度是测试样品中触珠蛋白浓度的量度。测试样品中触珠蛋白的量可以从标准曲线中插值得出,并根据样品稀释进行校正。
试剂(足够进行96次测定的数量)
稀释液浓缩液(测定缓冲液)
一瓶含有50毫升5倍浓缩稀释液测定缓冲液。
洗涤液浓缩液
一瓶含有50毫升20倍浓缩洗涤液。
酶-抗体结合物100倍
一瓶含有150微升与辣根过氧化物酶结合的亲和纯化抗人触珠蛋白抗体,在稳定缓冲液中。
显色底物溶液
一瓶含有12毫升3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)和过氧化氢的柠檬酸缓冲液,pH值为3.3。
终止液
一瓶含有12毫升0.3 M硫酸。
警告:避免与皮肤接触。
抗人触珠蛋白ELISA微孔板
十二个可移动的八(8)孔微孔条置于微孔板支架框架中。每个孔都涂有亲和纯化抗人触珠蛋白。
人触珠蛋白校准液
一瓶含有冻干的人触珠蛋白校准液。
试剂准备
稀释液浓缩液
提供的稀释液为5倍浓缩液,必须用蒸馏水或去离子水(1份缓冲液浓缩液,4份dH2O)稀释1:5。
洗涤液浓缩液
提供的洗涤液为20倍浓缩液,必须用蒸馏水或去离子水(1份缓冲液浓缩液,19份dH2O)稀释1:20。浓缩液在储存温度较低时出现结晶并不罕见。稀释前将浓缩液加热至30-35°C可以溶解晶体。
酶-抗体结合物
通过向每个微孔板测试条添加10微升酶-抗体结合物至990微升1X稀释液中,计算每个微孔板测试条所需的工作结合物溶液量。均匀但轻柔地混合。避免起泡。
显色底物溶液
按提供状态直接使用。
终止液
按提供状态直接使用。
抗人触珠蛋白ELISA微孔板
按提供状态直接使用。揭开微孔板袋,从袋中取出板。取出在测定中不会使用的所有条和孔,放回袋中并重新密封,同时放入干燥剂。
人触珠蛋白校准液
向人触珠蛋白校准液中加入1.0毫升蒸馏或去离子水,轻轻混合直至溶解。校准液现在浓度为11.33微克/毫升(如果打算将来使用,重组校准液应分装并冷冻)。人触珠蛋白标准品需要在使用前立即准备。每步之间混合均匀。避免起泡。
ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。
作为ALPCO在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。
微信扫码在线客服