纤维蛋白原ELISA是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法(ELISA),用于检测人血清和血浆中纤维蛋白原的测定。仅供研究使用。不适用于诊断程序。
作为ALPCO在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品纤维蛋白原(人)ELISA试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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纤维蛋白原(人)ELISA试剂盒 | ALP-41-FIBHU-E01 | 查看 |
纤维蛋白原(人)ELISA试剂盒检测原理:
如图1所示,在这种测定中,样品中的纤维蛋白原(FIB)与已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗纤维蛋白原抗体发生反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后,加入与辣根过氧化物酶(HRP)偶联的抗纤维蛋白原抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的纤维蛋白形成复合物。经过另一次洗涤步骤后,通过添加显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)来测定结合的酶。结合的酶量与测试样品中纤维蛋白原的浓度成正比;因此,450纳米处的吸光度是测试样品中纤维蛋白原浓度的量度。测试样品中纤维蛋白原的量可以从标准曲线中插值得出,并根据样品稀释进行校正。
所需材料但未提供
精密移液器(2微升至1000微升),用于制备和分配稀释液
试管
微孔板洗涤器/抽吸器
蒸馏水或去离子水
微孔板读取器
用于制备试剂和缓冲溶液的各种玻璃器皿
计时器
离心机(用于样品收集)
抗凝剂(用于血浆样品收集)
样品收集和处理
所有血液成分和生物材料应视为潜在危险。
处理和处置时遵循通用预防措施。
如果血液样品出现凝块、明显溶血、脂血或样品完整性存在问题,请做好记录并谨慎解释结果。
下列样品收集和储存条件仅供参考。
未评估样品的稳定性。
血清样品 - 应通过静脉采血。血凝块形成后,通过离心分离血清。移除血清并立即进行测定,或分装后储存于-80°C(最好)或-20°C。避免反复冻融循环。
血浆样品 - 应将血液收集到含有抗凝剂的容器中,然后进行离心。立即进行测定或分装后储存于-80°C(最好)或-20°C。避免反复冻融循环。
已知干扰物质 - 浓度高于0.1%的叠氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。
样品稀释
测定要求每个测试样品在使用前进行稀释。每次进行测定时,所有样品都应进行双重测定。推荐的稀释比例仅供参考。稀释比例应基于未知样品的预期浓度,以使稀释后的样品落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样品水平,在运行整个板之前,强烈建议对一个或两个代表性样品进行系列稀释。
血清样品 - 建议的起始稀释比例为1:200。要制备1:200的样品稀释液,将2微升的样品转移到398微升的1X工作稀释液中。这会产生1:200的稀释液。彻底混合。
血浆样品 - 建议的起始稀释比例为1:10,000。要制备1:10,000的样品稀释液,将5微升的样品转移到495微升的1X工作稀释液中。这会产生1:100的稀释液。接下来,将1:100的稀释液再稀释,将5微升转移到495微升的1X工作稀释液中。这会产生1:10,000的稀释液。每个阶段都要彻底混合。
ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。
作为ALPCO在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。
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