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ALPCO 小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂C ELISA样品的收集和处理

发布者:艾美捷科技    发布时间:2024-09-30     
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半胱氨酸蛋白酶抑制剂C检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法(ELISA),用于检测小鼠血浆和血清样本中半胱氨酸蛋白酶抑制剂C的测定。


作为ALPCO在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂C ELISA产品仅用于科研,不可用于临床诊断。

产品名称货号详情

小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂C ELISA

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小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂C ELISA检测原理:

如图1所示,在这种测定中,样品中的Cystatin C与已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗Cystatin C抗体反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后,加入与辣根过氧化物酶(HRP)偶联的抗Cystatin C抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的Cystatin C形成复合物。经过另一次洗涤步骤后,通过添加显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)来测定结合的酶。结合的酶量与样品中测试的Cystatin C浓度直接相关;450纳米处的吸光度是测试样品中Cystatin C浓度的量度。测试样品中的Cystatin C量可以从标准曲线中插值得出,并根据样品稀释进行校正。

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样品收集和处理:

所有血液成分和生物材料应被视为潜在危险。

处理和处置时遵循通用预防措施。

如果血液样品出现凝固、严重溶血、脂血或样品完整性有问题,请做好记录,并谨慎解释结果。

下面列出的样品收集和储存条件仅供参考。

样品稳定性尚未评估。

血清样品:应通过静脉穿刺采集血液。血液凝固后,通过离心分离血清。移除血清并立即检测或分装后储存于-80°C(最好)或-20°C。避免反复冻融循环。

血浆样品:应将血液采集到含有抗凝剂的容器中,然后进行离心。立即检测或分装后储存于-80°C(最好)或-20°C。避免反复冻融循环。

已知干扰物质:浓度高于0.1%的叠氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。


样品稀释:

测定要求每个测试样品在使用前进行稀释。每次进行测定时,所有样品应以双份进行测定。推荐的稀释比例仅供参考。稀释应基于未知样品的预期浓度,以使稀释后的样品落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样品值,在运行整个板之前,对一个或两个代表性样品进行系列稀释是非常推荐的。

血清样品:建议的起始稀释比例是1:2,000。要制备1:2,000的样品稀释液,将5微升的样品转移到495微升的1X稀释液中。这会产生1:100的稀释液。彻底混合。接下来,将1:100的样品取30微升转移到570微升的1X稀释液中。这会产生1:2,000的稀释液。彻底混合。

血浆样品:建议的起始稀释比例是1:4,000。要制备1:4,000的样品稀释液,将5微升的样品转移到495微升的1X稀释液中。这会产生1:100的稀释液。彻底混合。接下来,将1:100的样品取20微升转移到780微升的1X稀释液中。这会产生1:4,000的稀释液。彻底混合。


试剂准备:

使用前将所有试剂置于室温(16°C至25°C)。

稀释液浓缩液 - 提供的稀释液为5倍浓缩液,必须用蒸馏水或去离子水(1份缓冲液浓缩液,4份dH2O)稀释1:5。

洗涤液浓缩液 - 提供的洗涤液为20倍浓缩液,必须用蒸馏水或去离子水(1份缓冲液浓缩液,19份dH2O)稀释1:20。浓缩液在储存温度较低时可能会有结晶形成。稀释前将浓缩液加热至30-35°C可以溶解晶体。

酶-抗体结合物 - 通过向每个微孔板测试条添加10微升酶-抗体结合物至990微升1X稀释液中,计算每个微孔板测试条所需的工作结合物溶液量。使用前立即稀释并避光。均匀但轻柔地混合。避免起泡。

预包被ELISA微孔板 - 按提供使用即可。打开箔袋,从袋中取出板。取出在测定中不会使用的条和孔,放回袋中并重新密封,连同干燥剂。

小鼠CYS校准液 - 根据批特定分析证明书准备。


ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。


作为ALPCO在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。


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