ALPCO 兔C-反应蛋白ELISA的灵敏度与特异性

兔C-反应蛋白CRP检测试剂盒是一种高度敏感的双位点酶联用于测定兔血清和血浆样本中CRP的免疫测定法（ELISA）。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品兔C-反应蛋白ELISA。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

兔C-反应蛋白ELISA检测原理：

双抗体夹心酶联免疫吸附测定（ELISA）的原理如图1所示。在这种测定中，样品中的C反应蛋白（CRP）与已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗CRP抗体反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）偶联的抗CRP抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的CRP形成复合物。经过另一次洗涤步骤后，通过添加显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）来测定结合的酶。结合的酶量与样品中测试的CRP浓度直接相关；因此，450纳米处的吸光度是测试样品中CRP浓度的量度。测试样品中的CRP量可以从标准曲线中插值得出，并根据样品稀释进行校正。

所需但未提供的物料：

- 精密移液器（2微升至1000微升），用于制备和分发稀释液

- 试管

- 微孔板洗涤器/抽吸器

- 蒸馏水或去离子水

- 微孔板读取器

- 制备试剂和缓冲溶液所需的各种玻璃器皿

- 计时器

- 用于样品处理的离心机

- 抗凝剂（用于血浆样品）

样品收集和处理：

所有血液成分和生物材料应被视为潜在危险。处理和处置时遵循通用预防措施。如果血液样品出现凝固、严重溶血、脂血或样品完整性有问题，请做好记录，并谨慎解释结果。下面列出的样品收集和储存条件仅供参考。样品稳定性尚未评估。

- 血清样品 - 应通过静脉穿刺采集血液。血液凝固后，通过离心分离血清。移除血清并立即检测或分装后储存于-80°C（最好）或-20°C。避免反复冻融循环。

- 血浆样品 - 应将血液采集到含有抗凝剂的容器中，然后进行离心。立即检测或分装后储存于-80°C（最好）或-20°C。避免反复冻融循环。

- 已知干扰物质 - 浓度高于0.1%的叠氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。

样品稀释：

测定要求每个测试样品在使用前进行稀释。每次进行测定时，所有样品应以双份进行测定。推荐的稀释比例仅供参考。稀释应基于未知样品的预期浓度，以使稀释后的样品落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样品水平，在运行整个板之前，对一个或两个代表性样品进行系列稀释是非常推荐的。

血清和血浆样品：建议的起始稀释比例为1:400。要制备1:400的样品稀释液，将2微升的样品转移到798微升的1X稀释液中。这会产生1:400的稀释液。彻底混合。

结果计算：

1. 从所有孔中减去平均背景值（标准零的平均吸光度读数）。

2. 对每个标准的平均重复读数进行平均，并使用结果构建标准曲线。通过使用能够生成四参数逻辑曲线拟合的计算机软件来减少数据来构建标准曲线。也可以使用二阶多项式（二次）或其他曲线拟合；然而，它们将是对数据的不太精确的拟合。

3. 从标准曲线中插值得到测试样品值。校正血清稀释因子，以得到原始样品中的CRP浓度。

附录A - 参考血清信息：

本试剂盒包含一瓶参考血清。请参阅随附的产品概况表以获取批特定信息。请注意以下几点：

1. 收到参考血清后应立即冷冻。如果储存得当，直到过期日期前都是稳定的。

2. 参考血清应适当稀释，以适应标准曲线范围。请参阅协议中的“样品稀释”部分以获取说明。

3. 在移液样品（程序部分）时，也应以双份移液参考血清。

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。