ALPCO c反应蛋白(猫)ELISA, 96孔试剂准备&文献参考

CRP检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法（ELISA），用于测量猫的CRP生物样本。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品c反应蛋白(猫)ELISA, 96孔。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

c反应蛋白(猫)ELISA, 96孔检测原理：

急性期蛋白是血浆蛋白，它们在感染、炎症或创伤后浓度增加。最早被发现的急性期蛋白是在1930年由Tillet和Frances在猫科动物中发现的。

这种C反应蛋白（CRP）之所以被称为CRP，是因为它能够使肺炎链球菌的C型多糖体沉淀。CRP是一种α球蛋白，质量在110,000到140,000道尔顿之间，由五个相同的亚基组成，这些亚基以非共价键方式组装成环状五聚体。它在肝脏中合成，在猫科动物中，通常作为血清的微量成分存在，水平低于0.3 mg/dl。在急性组织损伤后，血清中的含量迅速上升，一旦刺激因素消失，也会非常迅速地下降。已经提出，CRP的功能是帮助补体激活，影响吞噬细胞的功能，并增强细胞介导的细胞毒性。过去几年的研究表明，在血浆或血清中定量这些蛋白可以为检测、预后和疾病监测提供有价值的诊断信息，不仅在猫科动物中，在宠物和农场畜群中也是如此。

试剂（足够进行96次测定的数量）

1. 稀释液浓缩物（测定缓冲液）

一瓶含有50毫升5倍浓缩稀释运行缓冲液。

2. 洗涤液浓缩物

一瓶含有50毫升20倍浓缩洗涤液。

3. 酶-抗体结合物100倍

一瓶含有150微升与辣根过氧化物酶结合的亲和纯化抗猫CRP抗体，在稳定缓冲液中。

4. 显色基质溶液

一瓶含有12毫升3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）和过氧化氢在柠檬酸缓冲液中，pH值为3.3。

5. 终止液

一瓶含有12毫升0.3 M硫酸。警告：避免与皮肤接触。

6. 抗猫CRP ELISA微孔板

十二个可移动的八（8）孔微孔板条，在孔座架上。每个孔都涂有亲和纯化的抗猫CRP。

7. 猫CRP校准物

一瓶含有猫CRP校准物。

试剂准备

1. 稀释液浓缩物

提供的稀释液为5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1份缓冲液浓缩物，4份dH2O）按1:5稀释。

2. 洗涤液浓缩物

提供的洗涤液为20倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1份缓冲液浓缩物，19份dH2O）按1:20稀释。浓缩物在低温储存时可能会形成晶体。稀释前将浓缩物加热至30-35°C可以溶解晶体。

3. 酶-抗体结合物

通过向每个微孔板测试条使用的1X稀释液中添加10微升酶-抗体结合物和990微升来计算每个微孔板测试条所需的工作结合物溶液量。均匀混合，但要轻柔。避免产生泡沫。

4. 显色基质溶液

按提供的状态使用。

5. 终止液

按提供的状态使用。

6. 抗猫CRP ELISA微孔板

按提供的状态使用。打开微孔板袋，从袋中取出板。取出在测定中不会使用的所有条和孔，放回袋中并重新密封，同时放回干燥剂。

7. 猫CRP校准物

猫CRP校准物应分装并冷冻储存。其浓度为85.07微克/毫升，需要根据下面的图表在1X稀释液中进行稀释以供每次运行使用。猫CRP标准品需要在立即使用前准备（见下面的图表）。每个步骤之间要充分混合。避免产生泡沫。

文献参考：

1. Tillett, W.S. and T. Francis. 1930. Serological reactions in pneumonia with non-protein somatic fraction of

pneumococcus. J. Exp Med. 52:561-571.

2. Eckersal, P.D. 2000. Recent advances and future prospects for the use of acute phase proteins and markers of

disease in animals. Revue Med. Vet. 151(7): 577-584

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

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