ALPCO Clusterin(大鼠)ELISA试剂盒，96孔，确保数据的可靠性和重复性

Clusterin ELISA是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法（ELISA），用于测量大鼠血清、血浆和尿液样本中的簇集蛋白。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品Clusterin(大鼠)ELISA试剂盒，96孔。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

Clusterin(大鼠)ELISA试剂盒，96孔检测原理：

双抗体夹心酶联免疫吸附测定（ELISA）的原理如图1所示。在这种测定中，样品中的簇蛋白（clusterin）与已吸附到聚苯乙烯微孔板表面的抗簇蛋白抗体发生反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后，加入辣根过氧化物酶（HRP）偶联的抗簇蛋白抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的簇蛋白形成复合物。经过再次洗涤后，通过添加显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）来测定与免疫吸附剂结合的酶。结合的酶量与测试样品中簇蛋白的浓度成正比；因此，450纳米处的吸光度是测试样品中簇蛋白浓度的量度。测试样品中簇蛋白的量可以从标准曲线中插值得出，并根据样品稀释进行校正。

需要的材料但未提供：

- 精密移液器（2 ?L至1000 ?L），用于制备和分发稀释液

- 试管

- 微孔板洗涤/抽吸器

- 蒸馏水或去离子水

- 微孔板读取器

- 制备试剂和缓冲溶液所需的各种玻璃器皿

- 计时器

- 能够达到400 RPM的微孔板振荡器

- 离心机（用于样品收集）

- 抗凝剂（用于血浆样品收集）

样品收集和处理：

所有血液成分和生物材料应视为潜在危险。处理和处置时遵循通用预防措施。如果血液样品出现凝块、严重溶血、脂血或样品完整性受到质疑，请记录并谨慎解释结果。以下列出的样品收集和储存条件仅供参考。样品稳定性尚未评估。

- 血清样品 - 应通过静脉穿刺收集血液。血凝后通过离心分离血清。取出血清立即进行测定或分装后储存于-80°C（最好）或-20°C。避免反复冻融。

- 血浆样品 - 应将血液收集到含有抗凝剂的容器中，然后进行离心。立即进行测定或分装后储存于-80°C（最好）或-20°C。避免反复冻融。

- 尿液样品 - 使用无菌或干净的尿液收集器收集中段尿液。离心以去除细胞碎片。立即进行测定或分装后储存于-80°C（最好）或-20°C。避免反复冻融。

- 已知干扰物质 - 浓度高于0.1%的叠氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。

样品稀释：

测定要求每个样品在使用前进行稀释。每次进行测定时，所有样品都应以双份进行测定。推荐的稀释比例仅供参考。稀释比例应基于未知样品的预期浓度，以便稀释后的样品落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样品水平，在运行整个板之前，强烈建议对一个或两个代表性样品进行系列稀释。

- 血清样品 - 推荐的起始稀释比例为1:100。要制备1:100的样品稀释液，将5 ?L的样品转移到495 ?L的1X稀释液中。这会产生1:100的稀释比例。彻底混合。

- 血浆样品 - 推荐的起始稀释比例为1:100。要制备1:100的样品稀释液，将5 ?L的样品转移到495 ?L的1X稀释液中。这会产生1:100的稀释比例。彻底混合。

- 尿液样品 - 推荐的起始稀释比例为1:20。要制备1:20的样品稀释液，将20 ?L的尿液转移到380 ?L的1X稀释液中。这会产生1:20的稀释比例。彻底混合。

结果计算：

1. 从每个样品的测试值中减去平均背景值（标准零的平均吸光度读数）。

2. 对每个标准的平均重复读数进行平均，并使用结果构建标准曲线。通过使用能够生成四参数逻辑曲线拟合的计算机软件来减少数据来构建标准曲线。也可以使用二次多项式（二次）或其他曲线拟合；然而，它们对数据的拟合精度会较低。

3. 从标准曲线中插值得到测试样品值。校正稀释因子，以得出原始样品中的簇蛋白浓度。

附录A - 参考血清信息

本试剂盒中包含一瓶参考血清。有关批次特定的信息，请参考随附的产品概况表。请注意以下几点：

1. 参考血清在有效期内稳定。

2. 参考血清应适当稀释，以适应标准曲线。有关说明，请参考协议中的“样品稀释”部分。

3. 在移液样品（程序部分）时，也应以双份移液参考血清。

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。