ALPCO 白蛋白(猪)ELISA试剂盒，96孔：样品收集和处理方案

猪白蛋白ELISA是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定法（ELISA）用于测定猪血清、血浆和尿液中的白蛋白。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品白蛋白(猪)ELISA试剂盒，96孔。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

白蛋白(猪)ELISA试剂盒，96孔检测原理：

如图1所示，这种测定方法中，样品中的白蛋白与已吸附在聚苯乙烯微孔板表面的抗白蛋白抗体反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）偶联的抗白蛋白抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的白蛋白形成复合物。经过另一次洗涤步骤后，通过添加显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB），检测免疫吸附剂上的酶。结合的酶量与测试样品中白蛋白的浓度直接相关；因此，450纳米处的吸光度是测试样品中白蛋白浓度的量度。测试样品中的白蛋白量可以从标准曲线中插值得到，并根据样品稀释进行校正。

样品收集和处理

所有血液成分和生物材料应视为潜在危险物。处理和处置时应遵循通用预防措施。

如果血液样品出现凝固、严重溶血、脂血或样品完整性受到怀疑，请做好记录，并谨慎解释结果。

以下列出的样品收集和储存条件仅供参考。样品的稳定性尚未评估。

- 血清样品：应通过静脉穿刺收集血液。通过离心分离血清和细胞。取出血清并立即检测或分装后储存于-80°C（最好）或-20°C。避免反复冻融。

- 血浆样品：应将血液收集到含有抗凝剂的容器中，然后进行离心。立即检测或分装后储存于-80°C（最好）或-20°C。避免反复冻融。

- 尿液样品：使用无菌或清洁的尿液收集器收集中段尿液。离心以去除细胞碎片。立即检测或分装后储存于-80°C（最好）或-20°C。避免反复冻融。

- 已知干扰物质：浓度高于0.1%的叠氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。

样品稀释

该检测要求每个测试样品在使用前进行稀释。每次进行检测时，所有样品都应以双份量进行检测。推荐的稀释比例仅供参考。稀释应基于未知样品的预期浓度，以使稀释后的样品落在标准曲线的动态范围内。如果不确定样品值，强烈建议在运行整个板之前，先对一个或两个代表性样品进行系列稀释检测。

- 血清和血浆样品：建议起始稀释比例为1:400,000。要制备1:400,000的样品稀释液，将2微升样品转移到1998微升的1X稀释液中。这会产生1:1,000的稀释。接下来，将1:1,000的样品通过将2微升转移到798微升的1X稀释液中进行稀释。这会产生1:400,000的稀释。每个阶段都要彻底混合。

- 尿液样品：建议起始稀释比例为1:500。要制备1:500的样品稀释液，将2微升样品转移到998微升的1X稀释液中。这会产生1:500的稀释。彻底混合。

结果计算

1. 从所有孔的测试值中减去平均背景值（标准零的平均吸光度读数）。

2. 对每个标准的平均重复读数取平均值，并使用结果构建标准曲线。通过使用能够生成四参数逻辑（4-PL）曲线拟合的计算机软件来减少数据，构建标准曲线。也可以使用二阶多项式（二次）或其他曲线拟合，但它们对数据的拟合将不够精确。

3. 从标准曲线中插值得到测试样品值。校正稀释因子，以得到原始样品中的白蛋白浓度。

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

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