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ALPCO α1-抗凝乳胰蛋白酶ELISA试剂盒,96孔结果计算方案

发布者:艾美捷科技    发布时间:2024-09-27     
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阿尔法1-抗胰凝乳蛋白酶(CYT)检测试剂盒是一种高度敏感的双位点酶联人生物制品中α1-抗胰凝乳蛋白酶的免疫测定(ELISA)流体。


作为ALPCO在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品α1-抗凝乳胰蛋白酶ELISA试剂盒,96孔产品仅用于科研,不可用于临床诊断。

产品名称货号详情

α1-抗凝乳胰蛋白酶ELISA试剂盒,96孔

ALP-41-A1CHU-E01查看


α1-抗凝乳胰蛋白酶ELISA试剂盒,96孔检测原理:

双抗体夹心酶联免疫吸附测定的原理在图1中表示。在这种测定中,样品中的α1-抗糜蛋白酶与已吸附到聚苯乙烯微孔板表面的抗α1-抗糜蛋白酶抗体发生反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后,加入与辣根过氧化物酶(HRP)结合的抗CYT抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的CYT形成复合物。经过另一次洗涤步骤后,通过添加显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)来测定免疫吸附剂上结合的酶。结合的酶量与测试样品中CYT的浓度直接相关;因此,450纳米处的吸光度是测试样品中CYT浓度的量度。测试样品中CYT的量可以从标准品构建的标准曲线中插值得到,并根据样品稀释进行校正。

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程序的局限性

当完全理解了说明书中的信息,并遵循良好的实验室操作规范时,将获得可靠和可重复的结果。可能影响测定性能的因素包括仪器功能、玻璃器皿的清洁度、蒸馏水或去离子水的质量、试剂和样品移液的准确性、洗涤技术、孵育时间或温度。不要将试剂与其他批次或来源的试剂混合或替换。

材料需求但未提供

? 精密移液器(2微升至1000微升)用于制作和分发稀释液

? 试管

? 喷雾瓶或微孔板洗涤/抽吸器

? 蒸馏或去离子水

? 微孔板读取器

? 用于准备试剂和缓冲溶液的各种玻璃器皿

? 计时器

? 离心机

? 抗凝剂(用于血浆样品收集)


样品收集和处理

所有血液成分和生物材料应视为潜在危险。处理和处置时遵循通用预防措施。

如果血液样品出现凝块、严重溶血、脂血,或样品的完整性受到关注,请做记录,并谨慎解释结果。

下面列出的样品收集和储存条件是一般性指导。尚未评估样品的稳定性。

? 血清样品:应通过静脉采血。血凝块形成后通过离心分离血清。取出血清立即进行测定或分装并储存于-80°C(最好)或-20°C。避免反复冻融循环。

? 血浆样品:血液应收集到含有抗凝剂的容器中,然后进行离心。立即进行测定或分装并储存于-80°C(最好)或-20°C。避免反复冻融循环。

? 已知干扰物质:浓度高于0.1%的叠氮化物和硫柳汞会抑制酶反应。


结果计算:

1. 从每个样品的测试值中减去平均背景值(标准零的平均吸光度读数)。

2. 对每个标准的平均重复读数进行平均,并使用结果构建标准曲线。通过使用能够生成四参数逻辑曲线拟合的计算机软件来减少数据,构建标准曲线。也可以使用二阶多项式(二次)或其他曲线拟合;然而,它们对数据的拟合将不够精确。

3. 从标准曲线中插值得到测试样品值。校正稀释因子,以得到原始样品中CYT的浓度。

附录A - 参考血清信息

本试剂盒中包含一瓶参考血清。请参阅随附的产品概况表以获取特定批次的信息。请注意以下事项:

1. 如果储存得当,参考血清在有效期前都是稳定的。血清可以在2-8°C下储存长达1周,如果储存时间超过1周,则应冷冻。避免多次冻融循环。

2. 参考血清应按照产品概况表中描述的方式进行稀释。

3. 在移液样品(程序部分)的同时,也应以双份移液参考血清。


ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。


作为ALPCO在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。


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