ALPCO α1-抗胰蛋白酶(小鼠)ELISA试剂盒，96w（96孔板，高纯度抗体）

阿尔法1-抗胰蛋白酶是血液中的一种52kDA丝氨酸蛋白酶抑制剂（serpin），可保护组织免受炎症细胞中的酶，尤其是弹性蛋白酶。研究表明，在某些急性期炎症反应，α1-抗胰蛋白酶升高，以限制活化引起的损伤中性粒细胞及其弹性蛋白酶。α1-抗胰蛋白酶的疾病包括α1-抗胰蛋白酶缺乏症，一种遗传性疾病，可导致炎症期间严重的组织破坏。在严重的情况下，这可能会导致肺气肿和肝硬化。α1的遗传变异-抗胰蛋白酶确实存在。

阿尔法1-抗胰蛋白酶（A1AT）检测试剂盒是一种高灵敏度的双位点酶联免疫测定（ELISA）用于测量小鼠血清和血浆样本中的A1AT。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品α1-抗胰蛋白酶(小鼠)ELISA试剂盒，96w。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

α1-抗胰蛋白酶(小鼠)ELISA试剂盒，96w检测原理：

双抗体夹心酶联免疫吸附测定的原理在图1中表示。在这种测定中，样品中的α1-抗胰蛋白酶与已吸附到聚苯乙烯微孔板表面的抗α1-抗胰蛋白酶抗体发生反应。通过洗涤去除未结合的蛋白质后，加入与辣根过氧化物酶（HRP）结合的抗α1-抗胰蛋白酶抗体。这些酶标记的抗体与之前结合的α1-抗胰蛋白酶形成复合物。经过另一次洗涤步骤后，通过添加显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）来测定免疫吸附剂上结合的酶。结合的酶量与测试样品中α1-抗胰蛋白酶的浓度直接相关；因此，450纳米处的吸光度是测试样品中α1-抗胰蛋白酶浓度的量度。测试样品中α1-抗胰蛋白酶的量可以从标准品构建的标准曲线中插值得到，并根据样品稀释进行校正。

试剂（足够96次测定的数量）

1. 稀释液浓缩液（测定缓冲液）

一瓶含有50毫升5倍浓缩的稀释测定缓冲液。

2. 洗涤液浓缩液

一瓶含有50毫升20倍浓缩的洗涤液。

3. 酶-抗体结合物100倍

一瓶含有150微升亲和纯化的抗小鼠α1-抗胰蛋白酶抗体，与辣根过氧化物酶结合，并在稳定缓冲液中。

4. 显色底物溶液

一瓶含有12毫升3,3',5,5'-四甲基联苯胺（TMB）和过氧化氢，在柠檬酸缓冲液中，pH值为3.3。

5. 终止液

一瓶含有12毫升0.3M硫酸。

警告：避免与皮肤接触。

6. 抗小鼠α1-抗胰蛋白酶ELISA微孔板

十二个可移动的八（8）孔微孔条，在孔架中。每个孔都涂有亲和纯化的抗小鼠α1-抗胰蛋白酶。

7. 小鼠α1-抗胰蛋白酶校准品

一瓶含有冻干的小鼠α1-抗胰蛋白酶校准品。

仅限研究使用

试剂准备

1. 稀释液浓缩液

提供的稀释液是5倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1份缓冲液浓缩液，4份dH2O）稀释1:5。

2. 洗涤液浓缩液

提供的洗涤液是20倍浓缩液，必须用蒸馏水或去离子水（1份缓冲液浓缩液，19份dH2O）稀释1:20。当储存温度较低时，浓缩液中出现晶体并不罕见。在稀释前将浓缩液加热至30-35°C可以溶解晶体。

3. 酶-抗体结合物

通过向每个微孔板测试条添加10微升酶-抗体结合物至990微升1倍稀释液中，计算每个微孔板测试条所需的工作结合物溶液量。均匀但轻柔地混合。避免起泡。

4. 显色底物溶液

按供应状态直接使用。

5. 终止液

按供应状态直接使用。

6. 抗小鼠α1-抗胰蛋白酶ELISA微孔板

按供应状态直接使用。揭开微孔板袋封口，从袋中取出板。取出在测定中不会使用的所有条和孔，放回袋中并重新密封。

7. 小鼠α1-抗胰蛋白酶校准品

向小鼠α1-抗胰蛋白酶校准品中加入1.0毫升蒸馏或去离子水，轻轻混合直至溶解。校准品现在的浓度为1.7微克/毫升（如果打算将来使用，应分装并冷冻重悬的校准品）。小鼠α1-抗胰蛋白酶标准品需要在立即使用前准备（见下表）。每步之间充分混合。避免起泡。

结果

1.从每个样品的测试值中减去平均背景值。

2.使用标准品观察到的结果构建标准曲线。合适的曲线拟合是四参数物流曲线。二阶多项式（二次）或其他曲线拟合也可以使用。

3.从标准曲线中插值测试样本值。校正血清稀释因子，得出α1-原始样本中的抗胰蛋白酶浓度

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

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