ALPCO 抗-U1-70 ELISA：从实验室到临床实践的转化研究

Anti U1-70 ELISA是一种固相酶免疫测定法，采用重组人70 kDa U1-snRNP复合体蛋白，用于定量和定性检测人血清中针对70 kDa U1-RNP的抗体。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品抗-U1-70 ELISA。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

抗-U1-70 ELISA检测原理：

U1-snRNP复合体是一种小核糖核蛋白粒子，由富含尿嘧啶（因此称为U）的小核RNA和一组蛋白组成：70 kDa U1特异性核糖核蛋白加上蛋白A和C（以前统称为RNPs），以及由八种蛋白组成的Sm（Smith）抗原：B/B', D1, D2, D3, E, F和G。由于其蛋白组分Sm和RNPs，该复合体通常被称为RNP/Sm复合体。U1-snRNP复合体是剪接体复合体的一部分，它促进细胞核内前mRNA加工成成熟mRNA。

检测原理：

血清样本稀释至1:101后，在涂有特定抗原的微孔板中孵育。如果样本中存在抗体，它们会与抗原结合。未结合的部分在随后的步骤中被洗掉。之后，与辣根过氧化物酶（HRP）结合的抗人免疫球蛋白孵育，并与微孔板中样本的抗原-抗体复合体反应。未结合的结合物在随后的步骤中被洗掉。加入TMB底物产生酶促比色（蓝色）反应，通过稀释酸停止反应（颜色变为黄色）。色素的色度形成强度是与抗原-抗体复合体结合的结合物的量的功能，这与样本中相应抗体的初始浓度成正比。

将稀释1:101的血清样本孵育在涂有特定抗原的微孔板中。样本中的抗体，如果存在，会与抗原结合。未结合的部分在随后的步骤中被洗掉。之后，与辣根过氧化物酶（HRP）结合的抗人免疫球蛋白孵育，并与微孔板中样本的抗原-抗体复合体反应。未结合的结合物在随后的步骤中被洗掉。加入TMB底物产生酶促比色（蓝色）反应，通过稀释酸停止反应（颜色变为黄色）。色素的色度形成强度是与抗原-抗体复合体结合的结合物的量的功能，这与样本中相应抗体的初始浓度成正比。

试剂盒组成：

待重组：

- 样本缓冲液（5倍）1瓶，20毫升 - 5倍浓缩（白色瓶盖：黄色溶液）

成分：Tris、NaCl、牛血清白蛋白（BSA）、苯甲酸钠 < 0.1%（防腐剂）

- 洗涤缓冲液（50倍）1瓶，20毫升 - 50倍浓缩（白色瓶盖：绿色溶液）

即用型：

成分：Tris、NaCl、Tween 20、苯甲酸钠 < 0.1%（防腐剂）

阴性对照 1瓶，1.5毫升（绿色瓶盖：无色溶液）

成分：人血清（稀释）、牛血清白蛋白（BSA）、苯甲酸钠 < 0.1%（防腐剂）

阳性对照 1瓶，1.5毫升（红色瓶盖：黄色溶液）

成分：人血清（稀释）、牛血清白蛋白（BSA）、苯甲酸钠 < 0.1%（防腐剂）

截止校准品 1瓶，1.5毫升（蓝色瓶盖：黄色溶液）

成分：人血清（稀释）、牛血清白蛋白（BSA）、苯甲酸钠 < 0.1%（防腐剂）

校准品 6瓶，每瓶1.5毫升 0, 3, 10, 30, 100, 300 U/ml

（颜色随浓度增加而加深：黄色溶液）

成分：人血清（稀释）、牛血清白蛋白（BSA）、苯甲酸钠 < 0.1%（防腐剂）

结合物 1瓶，15毫升 IgG（蓝色瓶盖：蓝色溶液）

成分：与辣根过氧化物酶结合的抗人免疫球蛋白，牛血清白蛋白（BSA）

TMB底物 1瓶，15毫升（黑色瓶盖：无色溶液）

成分：稳定的TMB/H2O2

终止溶液 1瓶，15毫升（白色瓶盖：无色溶液）

成分：1M盐酸

微孔板 12x8孔条，带有可分离的微孔

涂层 见第1段

文献参考：

1. Peter JB, Shoenfeld Y (1996). Autoantibodies.Elsevier Sciences B.V., Amsterdam

2. Hackl W, Fischer U, Luhrmann R (1994).A 69 kD protein that associates reversibly with the Sm core domain of several splicosomal snRNP species.J Cell Biol 124: 261-272.

3. Guldner HH (1992). Mapping of epitopes recognized by anti-(U1)RNP antibodies. Mol Biol Rep 16: 155-164.

4. Klein Gunnewiek JMT, Van de Putte LBA, van Venrooij WJ (1997). The U1 snRNP complex: An autoantigen in connective tissue diseases: An update. Clin Exp Rheumatol 15: 549-560.

5. Von Mühlen CA, Tan EM (1995). Autoantibodies in the diagnosis of systemic rheumatic diseases.Semin Arthritis Rheum 24: 323-358.

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

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