ALPCO 抗组织转谷氨酰胺酶-G ELISA检测原理和临床应用说明

抗组织转谷氨酰胺酶-G ELISA是一种固相酶免疫测定法，用于检测组织新表位IgG抗体的定量和定性检测人血清中的转谷氨酰胺酶（tTG）。使用重组人的检测与醇溶蛋白特异性肽交联的转谷氨酰胺酶显示tTG的新表位这确保了测试的灵敏度和特异性显著提高。该检测是诊断乳糜泻（麸质敏感肠病）的工具。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品 抗组织转谷氨酰胺酶-G ELISA。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

 抗组织转谷氨酰胺酶-G ELISA临床应用

对麸质敏感的肠病或乳糜泻的特征是小肠绒毛萎缩，导致所谓的平坦粘膜。它是由对麦胶蛋白中可溶于酒精的部分——麦胶蛋白（存在于小麦、黑麦和大麦中）的病理性不耐受引起的。由于乳糜泻是由摄入麦胶蛋白引起的，因此无麦胶蛋白饮食可以完全治愈这种疾病，并且必须终身维持。重新摄入麦胶蛋白会导致症状复发。该病与HLA有关（超过95%的患者具有DQ2，由DQA1*0501和DQB1*0201编码），可以在任何年龄发病，高峰发病期在儿童早期，甚至在新生儿中。在欧洲国家的发病率从1/4000到1/300不等。

乳糜泻的诊断是通过小肠活检（显示平坦粘膜）并结合血清学标志物进行的。抗麦胶蛋白抗体和抗内皮细胞抗体（EMA）具有重要意义。它们迄今通过间接免疫荧光法检测，这仅限于IgA亚类。组织转谷氨酰胺酶（tTG）作为EMA的主要靶抗原的发现，为乳糜泻的诊断提供了更容易、更可靠的方法。tTG是一种酶，在受伤时从细胞中释放出来，认为它有助于组织修复。

抗tTG抗体比抗麦胶蛋白抗体显示出更高的灵敏度和特异性。此外，它们与疾病的活动性密切相关，因此对于饮食监测特别有用。tTG与麦胶蛋白特异性肽段的交联产生了tTG的新表位。由于这些新表位在结构上更接近生理抗原，tTG检测显示出显著增加的灵敏度和特异性。这些表位与麦胶蛋白没有交叉反应。

对于IgA缺乏的2%到5%的患者，IgG抗tTG抗体的测定是唯一可用的特异性血清学检测。通过筛查抗tTG检测到了许多亚临床病例，这支持了大多数乳糜泻病例未被检测和治疗的理论（冰山模型）。

检测原理：

血清样本稀释至1:101后，在涂有特定抗原的微孔板中孵育。如果样本中存在抗体，它们会与抗原结合。未结合的部分在随后的步骤中被洗掉。之后，与辣根过氧化物酶（HRP）结合的抗人免疫球蛋白孵育，并与微孔板中样本的抗原-抗体复合体反应。未结合的结合物在随后的步骤中被洗掉。加入TMB底物产生酶促比色（蓝色）反应，通过稀释酸停止反应（颜色变为黄色）。色素的色度形成强度是与抗原-抗体复合体结合的结合物的量的功能，这与样本中相应抗体的初始浓度成正比。

储存和保质期

将所有试剂和微孔板存放在2-8°C/35-46°F的条件下，并使用原装容器。一旦准备好，重组溶液在2-8°C/35-46°F下稳定1个月。试剂和微孔板应在每个组件上标明的有效期内使用。避免TMB溶液强烈暴露于光线下。将微孔板存放在指定的铝箔中，包括干燥剂，并密封紧固。

健康危害数据

本产品仅供体外诊断使用。因此，只有经过培训并特别指导体外诊断方法的工作人员才能使用该试剂盒。虽然在预期使用条件下本产品不被认为是特别有毒或危险的，但为确保最大安全性，请参考以下内容：

建议和注意事项

本试剂盒含有潜在的危险成分。尽管试剂盒中的试剂未被分类为对眼睛和皮肤有刺激性，但仍建议避免与眼睛和皮肤接触，并佩戴一次性手套。

警告！校准品、对照品和缓冲液含有作为防腐剂的叠氮化钠（NaN3）。如果摄入或通过皮肤或眼睛吸收，NaN3可能有毒。NaN3可能与铅和铜管道反应形成高度易爆的金属叠氮化物。处理时，请用大量水冲洗以防止叠氮化物积累。请参阅CDC或其他当地/国家指南中概述的去污程序。

在操作试剂盒时，请勿吸烟、进食或饮水。不要使用口吸移液管。

本试剂盒中使用的某些试剂的人类来源材料（例如对照品、标准品）已通过批准的方法进行了检测，结果对乙型肝炎表面抗原（HbsAg）、丙型肝炎和HIV 1呈阴性。然而，没有任何测试可以完全保证这些材料中没有病毒代理。因此，应按照国家要求处理试剂盒的对照品、标准品和样本，视其为可能传播传染病的材料。

试剂盒含有动物源性材料，如目录表中所述；请根据国家要求进行处理。

确切的临床诊断不应仅基于所执行测试的结果，而应由医生在评估了所有临床和实验室检查结果之后做出。诊断应使用不同的诊断方法进行验证。

文献参考：

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ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

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