凝血酶原-A是一种固相酶免疫测定法,使用天然人凝血酶原(因子II)定量和定性检测针对凝血酶原的IgA抗体在人血清中。该检测是诊断抗磷脂综合征的工具。
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抗凝血酶(IgA)ELISA | ALP-35-PTAHU-E01 | 查看 |
抗凝血酶(IgA)ELISA检测原理:
人因子I(凝血酶原)是一种分子量为72 kDa的血浆酶原。它与活化形式的因子V、因子X和磷脂组装形成一种催化单元,称为凝血酶复合体。在钙离子的存在下,该复合体将膜结合的凝血酶原切割成凝血酶,然后释放到可溶相中。
针对凝血酶原的抗体属于特异性针对带负电荷的磷脂、生物膜成分和凝血酶原的抗磷脂抗体组。抗磷脂抗体的存在已与所谓的抗磷脂综合征(APS)的临床特征相关联。许多研究表明,这些自身抗体与血栓形成、血小板减少和习惯性流产(由于胎盘梗死的后果)的增加发生率之间存在相关性。致病性抗磷脂抗体诱导血栓形成的确切机制尚未完全揭示。
在SLE(系统性红斑狼疮)和相关疾病患者中出现抗磷脂抗体是继发性抗磷脂综合征(APS)的典型特征。相比之下,没有其他自身免疫疾病患者的抗磷脂抗体特征是原发性抗磷脂综合征(APS)。
最近描述的仅针对凝血酶原的抗体与APS患者胎儿丢失高度相关。凝血酶原抗体是这种严重并发症的第一个标志,因为所有已知的其他抗磷脂抗体未能与胎儿丢失相关联。
此外,针对凝血酶原和磷脂酰丝氨酸复合体的抗体与APS的第二大临床症状群,即静脉和动脉血栓形成有关。然而,它们未能显示出与胎儿丢失的任何相关性。
因此,这两种类型的抗体作为重要的诊断工具,用于鉴别诊断APS异质性表现。
需要重新配制的:
5倍样本缓冲液1瓶,20毫升 - 5倍浓缩(白色瓶盖:黄色溶液)
成分:Tris, NaCl, 牛血清白蛋白(BSA), 叠氮化钠 < 0.1%(防腐剂)
50倍洗涤缓冲液1瓶,20毫升 - 50倍浓缩(白色瓶盖:绿色溶液)
成分:Tris, NaCl, 吐温20, 叠氮化钠 < 0.1%(防腐剂)
即用型:
阴性对照1瓶,1.5毫升(绿色瓶盖:无色溶液)
成分:人血清(稀释), 叠氮化钠 < 0.1%(防腐剂)
阳性对照1瓶,1.5毫升(红色瓶盖:黄色溶液)
成分:人血清(稀释), 叠氮化钠 < 0.1%(防腐剂)
截止校准液1瓶,1.5毫升(蓝色瓶盖:黄色溶液)
成分:人血清(稀释), 叠氮化钠 < 0.1%(防腐剂)
校准液6瓶,每瓶1.5毫升,浓度分别为0, 3, 10, 30, 100, 300 U/ml
(颜色随浓度增加而加深:黄色溶液)
成分:人血清(稀释), 叠氮化钠 < 0.1%(防腐剂)
结合物1瓶,15毫升IgA(红色瓶盖:红色溶液)
成分:与辣根过氧化物酶结合的抗人免疫球蛋白
TMB底物1瓶,15毫升(黑色瓶盖)
成分:稳定的TMB/H2O2
停止液1瓶,15毫升(白色瓶盖:无色溶液)
成分:1M盐酸
微孔板12x8孔条,带有可拆卸的微孔
涂覆请参见第1段
样本收集、处理和储存
优先使用新鲜收集的血清样本。采血必须遵循国家要求。
不要使用黄疸、脂血、溶血或细菌污染的样本。含有颗粒的血清应通过低速离心(<1000 x g)清除。血液样本应收集在干净、干燥的空管中。分离后,血清样本应立即使用,或紧闭存放在2-8°C/35-46°F下最多三天,或在-20°C/-4°F下冷冻保存更长时间。
技术参数:
样本材料:血清
样本体积:10微升样本稀释1:101,使用1倍样本缓冲液
总孵育时间:在20-32°C/68-89.6°F下孵育90分钟
校准范围:0-300 U/ml
分析灵敏度:1.0 U/ml
储存:在2-8°C/35-46°F下使用原瓶储存,仅限
测定数量:96次测试
文献参考:
1.FurieBandFurieBC(1988)
Themolecularbasisofbloodcoagulation.
Cell53:505-518.
2.MannKG,NesheimME,TracyPB,HibbardLS,BloomJS(1982).
Assemblyoftheprothrombinasecomplex.
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3.Boey,ML,Colaco,CB,Gharavi,AE,etal.(1983):
Thrombosisinsystemiclupuserythematosus:strikingassociationwiththepresenceof
circulatinglupusanticoagulant.
Br.Med.J.287,1021-1023.
4.T.Atsumi,M.Ieko,M.L.Bertolaccini,K.Ichikawa,A.Tsutsumi,E.Matsuura,T.Koike
(2000).
Associationofautoantibodiesagainstthephosphatidylserine-prothrombincomplexwith
manifestationsoftheantiphospholipidsyndromeandwiththepresenceofthelupus
anticoagulant.
Arthritis&Rheumatism43:1982-1993.
5.P.vonLandenberg,T.Matthias,J.Zaech,M.Schultz,M.Lorber,M.Blank,Y.Shoenfeld
(2003).
Antiprothrombinantibodiesareassociatedwithpregnancylossinpatientswiththe
antiphospholipidsyndrome.
AmJReprodImmunol49:51-56.
ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。
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