ALPCO 抗LKM-1 ELISA实验室指南：高灵敏度与特异性表现

抗LKM-1（肝肾微粒体）（IgG）ELISA是一种固相酶免疫测定法，采用重组人细胞色素p450 IID6用于抗体的定量和定性检测抗人血清中的肝肾微粒体（LKM）。该检测是研究自身免疫的工具肝炎（AIH）。该测定不用于诊断程序。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品抗LKM-1 ELISA。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

抗LKM-1 ELISA检测原理：

血清样本稀释至1:101后，在涂有特定抗原的微孔板中孵育。

如果样本中存在抗体，它们会与抗原结合。未结合的部分在随后的步骤中被洗掉。之后，与辣根过氧化物酶（HRP）结合的抗人免疫球蛋白（结合物）被孵育，并与微孔板中样本的抗原-抗体复合物反应。未结合的结合物在随后的步骤中被洗掉。加入TMB底物后，会产生一个酶促比色（蓝色）反应，这种反应可以通过稀释的酸停止（颜色变为黄色）。从色原生成的颜色强度是与抗原-抗体复合物结合的结合物数量的函数，这与样本中相应抗体的初始浓度成正比。

试剂盒组成：

需要重新配制的：

5倍样本缓冲液1瓶，20毫升 - 5倍浓缩（白色瓶盖：黄色溶液）

成分：Tris, NaCl, 牛血清白蛋白（BSA）, 叠氮化钠 < 0.1%（防腐剂）

50倍洗涤缓冲液1瓶，20毫升 - 50倍浓缩（白色瓶盖：绿色溶液）

成分：Tris, NaCl, 吐温20, 叠氮化钠 < 0.1%（防腐剂）

即用型：

低浓度对照1瓶，1.5毫升（绿色瓶盖：无色溶液）

成分：人血清（稀释），牛血清白蛋白（BSA）, 叠氮化钠 < 0.1%（防腐剂）

高浓度对照1瓶，1.5毫升（红色瓶盖：黄色溶液）

成分：人血清（稀释），牛血清白蛋白（BSA）, 叠氮化钠 < 0.1%（防腐剂）

校准液1瓶，1.5毫升（蓝色瓶盖：黄色溶液）

成分：人血清（稀释），牛血清白蛋白（BSA）, 叠氮化钠 < 0.1%（防腐剂）

标准品6瓶，每瓶1.5毫升（每瓶白色瓶盖：黄色溶液*）

每个标准品的浓度：0, 3, 10, 30, 100, 300 U/ml

成分：人血清（稀释），牛血清白蛋白（BSA）, 叠氮化钠 < 0.1%（防腐剂）

结合物1瓶，15毫升IgG（蓝色瓶盖：蓝色溶液）

成分：与辣根过氧化物酶结合的抗人免疫球蛋白，牛血清白蛋白（BSA）

TMB底物1瓶，15毫升（黑色瓶盖：无色溶液）

成分：稳定的四甲基联苯胺和过氧化氢（TMB/H2O2）

停止液1瓶，15毫升（白色瓶盖：无色溶液）

成分：1M盐酸

微孔板12 x 8孔条，带有可拆卸的微孔

涂覆请参见第1段

储存和保质期

将所有试剂和微孔板储存在2-8°C/35-46°F的条件下，存放在原始容器中。一旦配制好，重新配制的溶液在2-8°C/35-46°F下可稳定保存1个月。试剂和微孔板只能在每个组件上标示的有效期内使用。避免将TMB溶液暴露在强烈光线下。将微孔板存放在指定的铝箔中，包括干燥剂，并密封紧密。

文献参考：

1.KrawittEL(1996).

AutoimmuneHepatitis.

NEnglJMed334:897-903.

2.MeyerzumBüschenfeldeKH,LohseAW(1995).

AutoimmuneHepatitis.

NEnglJMed333:1004-1005.

3.AlvarezF,BergPA,Bianchietal.(1999).

InternationalAutoimmuneHepatitisGroupReport:areviewofcriteriafordiagnosisof

autoimmunehepatitis.

JHepatol31:929-938.

4.MannsMPetal.(1991).

LKM-1autoantibodiesrecognizeashortlinearsequenceinP450IID6,acytochromeP-450

monooxygenase.JClinInvest88:1370-1378.

5.HombergJC,AndreC,AbuafA(1984).

Anewanti-liver-kidneymicrosomeantibody(anti-LKM-2)intienilicacid-inducedhepatitis.

ClinExpImmunol55:561-570.

6.PhilippT,DurazzoM,TrautweinC,AlexB,StraubP,LambJG,JohnsonEF,TukeyRH,

MannsMP(1994).

RecognitionofuridinediphosphateglucuronosyltransferasesbyLKM-3antibodiesinchronic

hepatitisD.Lancet344:578-81.

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

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