ALPCO 抗Jo-1 IgG ELISA检测原理&使用通用指南

抗Jo-1抗体针对的是组氨酸tRNA合成酶（HRS）的反应位点，HRS是一种属于氨酰转移酶组的细胞质酶。这些酶负责将相应的氨基酸（对于HRS来说是组氨酸）与其相应的转移RNA连接起来。HRS在细胞中以同源二聚体的形式存在，其大约50 kDa的相同亚基每个都与tRNA结合。测量抗Jo-1抗体对于研究多发性肌炎或皮肌炎是有用的。

抗Jo-1 ELISA是一种固相酶免疫分析，使用重组人组氨酸tRNA合成酶（HRS）来定量和定性检测人血清中针对Jo-1的抗体。含有抗Jo-1抗体的人血清仅识别高等真核生物的HRS，并与人酶具有最高的亲和力。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品抗Jo-1 IgG ELISA。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

抗Jo-1 IgG ELISA检测原理：

将1:101稀释的血清样本孵育在涂有特定抗原的微孔板中。

样本中存在的抗体会与抗原结合。未结合的部分在随后的步骤中被洗掉。

然后孵育与辣根过氧化物酶结合的抗人免疫球蛋白（结合物），并与微孔板中样本的抗原-抗体复合物发生反应。

未结合的结合物在随后的步骤中被洗掉。

添加TMB底物会产生一种酶促比色（蓝色）反应，这种反应通过停止液（稀释酸）停止，颜色变为黄色。

色素产生的色度强度是与抗原-抗体复合物结合的结合物数量的函数，这与样本中相应抗体的初始浓度成正比。

使用通用指南

- 如果产品信息，包括标签，有缺陷或错误，请与ALPCO联系。

- 不要混合或替换不同批号的试剂或微孔板。这可能会导致结果变化。

- 使用前让所有组分达到室温（20-32°C/68-89.6°F），充分混合并遵循推荐的孵育方案，以获得最佳测试性能。

- 孵育：建议在30°C/86°F下运行自动化测试系统。

- 永远不要将组分暴露在高于37°C/98.6°F的温度下。

- 永远只使用全新的吸头吸取底物溶液。保护这种试剂免受光线照射。永远不要使用之前与其他试剂接触过的吸头吸取结合物。

样本收集、处理和储存

最好使用新鲜收集的血清样本。采血必须遵循国家要求。不要使用黄疸、脂血、溶血或细菌污染的样本。含有颗粒的血清应通过低速离心（<1000 xg）清除。血液样本应收集在干净、干燥和空的试管中。

分离后，血清样本应在首次8小时内使用，或在2-8°C/35-46°F下紧密封闭保存长达48小时（2天），或在-20°C/-4°F下冷冻保存更长时间。

试剂：

稀释浓缩试剂：

- 将浓缩样本缓冲液1:5稀释蒸馏水（例如，20 mL加80 mL）。

- 将浓缩洗涤缓冲液1:5稀释蒸馏水（例如，20 mL加980 mL）。

- 建议标记不同校准液的瓶盖，以避免错误。

样本：

用样本缓冲液（1x）将血清样本稀释1:101

例如，1000 ?L样本缓冲液（1x）+ 10 ?L血清。充分混合！

洗涤：

每8个孔准备20 mL稀释洗涤缓冲液（1x），或96个孔准备200 mL

例如，4 mL浓缩液加196 mL蒸馏水。

自动化洗涤：

考虑设置仪器和机器人移液器死体积所需的额外体积。

手动洗涤：

将孔中的液体倒出并倒置微孔板。将微孔框架在带有孔的干净吸收纸上剧烈敲击。向每个孔中吸取300 ?L稀释洗涤缓冲液，等待20秒。再次重复整个程序两次。

微孔板：

计算检测运行所需的孔数。从框架中移除未使用的孔，放回提供的塑料袋中，与干燥剂一起，紧密密封（2-8°C/35-46°F）。

文献参考：

1. Nishikai and Reichlin (1980). Heterogeneity of precipitating antibodies in polymyositis and dermatomyositis. Characterization of the Jo-1 antibody system. Arthritis Rheum 23: 881-888.

2. Love LA, Leff RL, Fraser DD, Targoff IN, Dalakas M, Plotz PH, Miller FW (1991). A new approach to the classification of idiopathic inflammatory myopathy: myositis-specific autoantibodies define useful homogeneous patient groups. Medicine (Baltimore) 70: 360- 374.

3. Miller FW, Twitty SA, Biswas T, Plotz PH (1990a). Origin and regulation of a disease-specific autoantibody response. Antigenic epitopes, spectro type stability and isotype restriction of anti-Jo-1 autoantibodies. J Clin Invest 85: 468-475.

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。