α-Fodrin Check是一种使用重组人α-Fodlin的固相酶免疫测定法,用于定量和定性检测针对α-Foddin的IgA和IgG抗体。该检测是诊断干燥综合征的工具
作为ALPCO在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品 甲胎蛋白检查(IgG、IgA)ELISA。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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甲胎蛋白检查(IgG、IgA)ELISA | ALP-35-AFCHU-E01 | 查看 |
甲胎蛋白检查(IgG、IgA)ELISA检测原理:
血清样本稀释至1:101后,在包被有抗原的微孔板中孵育。随后的步骤中,未结合的部分被洗去。之后,与辣根过氧化物酶结合的抗人免疫球蛋白(结合物)被孵育,并与微孔板中样本的抗原-抗体复合物发生反应。在随后的步骤中,未结合的结合物被洗去。添加TMB底物产生酶促比色(蓝色)反应,该反应通过稀释的酸停止(颜色变为黄色)。从色素原形成颜色的速率是结合到抗原-抗体复合物的结合物的量的功能,这与患者样本中相应抗体的初始浓度成正比。
需要重悬的试剂:
- 5倍样本缓冲液1瓶,20毫升 - 5倍浓缩(白色瓶盖:黄色溶液)
包含:Tris, NaCl, BSA, 亚硝酸钠 < 0.1%(防腐剂)
- 50倍洗涤缓冲液1瓶,20毫升 - 50倍浓缩(白色瓶盖:绿色溶液)
包含:Tris, NaCl, Tween 20, 亚硝酸钠 < 0.1%(防腐剂)
即用型试剂:
- 阴性对照1瓶,1.5毫升(绿色瓶盖:无色溶液)
包含:人血清(稀释),亚硝酸钠 < 0.1%(防腐剂)
- 阳性对照1瓶,1.5毫升(红色瓶盖:黄色溶液)
包含:人血清(稀释),亚硝酸钠 < 0.1%(防腐剂)
- 截止校准液1瓶,1.5毫升(蓝色瓶盖:黄色溶液)
包含:人血清(稀释),亚硝酸钠 < 0.1%(防腐剂)
- 校准液6瓶,每瓶1.5毫升 0, 3, 10, 30, 100, 300 U/ml(颜色随浓度增加而加深:黄色溶液)
包含:人血清(稀释),亚硝酸钠 < 0.1%(防腐剂)
- 结合物1瓶,15毫升 IgA/G(白色瓶盖:红色溶液)
包含:与辣根过氧化物酶结合的抗人免疫球蛋白
- TMB底物1瓶,15毫升(黑色瓶盖)
包含:稳定的TMB/H2O2
- 停止溶液1瓶,15毫升(白色瓶盖:无色溶液)
包含:1M盐酸
- 微孔板12x8孔条,带有可分离的微孔
移液前的准备
稀释浓缩试剂:将浓缩样本缓冲液按1:5的比例用蒸馏水稀释(例如20毫升加80毫升)。将浓缩洗涤缓冲液按1:50的比例用蒸馏水稀释(例如20毫升加980毫升)。
样本:将血清样本按1:101的比例用样本缓冲液(1x)稀释,例如1000微升样本缓冲液(1x)+ 10微升血清。混合均匀!
洗涤:
每8个孔准备20毫升稀释洗涤缓冲液(1x),或96孔则准备200毫升(例如4毫升浓缩液加196毫升蒸馏水)。
自动洗涤:考虑设置仪器和机器人移液管死体积所需的额外体积。
手动洗涤:将孔中的液体倒置板子倒掉。将微孔板框架孔朝下在干净的吸水纸上用力敲击。向每个孔中移液300微升稀释洗涤缓冲液,等待20秒。再次重复整个程序两次。
微孔板:
计算测试所需的孔数。从框架中移除未使用的孔,放回提供的塑料袋中,与干燥剂一起密封存放(2-8°C/35-46°F)。
ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。
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