ALPCO 促甲状腺激素（TSH）ELISA：提高检测准确性和重复性的策略

用于人血清中促甲状腺激素（TSH）的定量测定。仅供研究使用。诊断程序中使用的注意事项。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品促甲状腺激素（TSH）ELISA。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

促甲状腺激素（TSH）ELISA检测原理：

促甲状腺激素（TSH）酶联免疫吸附测定（ELISA）基于固相酶联免疫吸附测定的原理。该测定系统利用一种独特的单克隆抗体，针对完整的TSH分子上的一个独特抗原决定簇。小鼠单克隆抗TSH抗体用于固相固定（在微孔板孔上）。山羊抗TSH抗体在抗体-酶（辣根过氧化物酶）结合溶液中。样本被允许与两种抗体同时反应，导致TSH分子被夹在固相和酶联抗体之间。在室温下孵育60分钟或过夜后，用水润洗孔以去除未结合的标记抗体。加入TMB溶液并孵育20分钟，导致蓝色出现。通过加入停止溶液（1N盐酸），颜色发展停止，颜色变为黄色。TSH的浓度与测试样本的颜色强度成正比。在450纳米处用分光光度计测量吸光度。

试剂材料

试剂盒提供的物料：

1. 抗体包被孔（1板，96孔）：用小鼠单克隆抗TSH抗体包被的微孔板。

2. 酶结合试剂（1瓶，13 mL）：含有与辣根过氧化物酶结合的山羊抗TSH抗体。

3. 参考标准组[标准1-6]（每级1瓶；共6瓶）：含有0, 0.5, 2, 5, 10和25 ?IU/mL（WHO, 第2次国际参考品，80/558）的TSH，溶于含防腐剂的马血清中，冻干。

4. TMB试剂（1瓶，11 mL）：含有在缓冲溶液中稳定的3,3',5,5'四甲基联苯胺（TMB）。

5. 停止溶液（1N盐酸），1瓶，11 mL 含有稀释的盐酸。

试剂盒未提供的物料：

1. 蒸馏水或去离子水

2. 精密移液管：50 ?L, 100 ?L, 200 ?L 和 1 mL

3. 一次性移液管头

4. 漩涡混合器或同等设备

5. 能够读取450nm吸光度的微孔板读取器

6. 吸水纸

7. 坐标纸（半对数等）

8. 质量控制材料（例如，BioRad Lyphochek对照血清）

9. 计时器

试剂盒的储存

收到后未开封的试剂盒应存放在2-8°C的环境中，并且在不使用时，直到试剂盒标签上显示的有效期为止。参考包装标签上的有效期。除冻干标准品外，开封并使用过的试剂，如果适当储存在2-8°C，直到有效期都是稳定的。重悬的标准品在2-8°C密封储存时，稳定期长达30天。将微孔板存放在带有干燥剂的密封袋中，以减少潮湿空气的接触。

仪器

450纳米波长下带宽为10纳米或更小，光密度范围为0-2 OD或更大的微孔板读取器适用于吸光度测量。

样本收集和准备

应从通过可接受技术获得的全血样本中制备血清。本试剂盒仅适用于无添加剂的血清样本。避免使用明显溶血、脂血或浑浊的样本。样本应加盖，并可在2-8°C下储存长达48小时，然后用于测定。需要更长时间储存的样本应仅在-20°C下冷冻一次，然后使用。解冻的样本在测试前应多次倒置。

标准曲线示例:

该测定的典型标准运行结果如下所示。标准曲线仅用于说明，不应用于计算未知值。标准曲线涵盖了0至25?IU/mL的动态范围。由于在不同实验室的不同室温下孵育，吸光度（450 nm）值可能会有所不同。

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。