总IgE ELISA用于定量测定人血清中的免疫球蛋白E。仅供研究使用。不用于诊断程序。
作为ALPCO在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品总IgE ELISA。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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总IgE ELISA | ALP-25-IGEHU-E01 | 查看 |
总IgE ELISA检测原理:
总IgE酶联免疫吸附测定(ELISA)基于固相酶联免疫吸附测定(ELISA)。该测定系统使用一种单克隆抗IgE抗体进行固相(微孔板)固定,以及山羊抗IgE抗体在抗体-酶(辣根过氧化物酶)结合溶液中。血清样本被加入到包被有IgE抗体的微孔板中,并与零缓冲液在室温下孵育30分钟。如果样本中存在人类IgE,它将与孔中的抗体结合。然后对孔进行洗涤以去除任何残留样本,加入标记有辣根过氧化物酶的IgE抗体(结合物)。结合物将免疫学地与孔中的IgE结合,导致IgE分子被夹在固相和酶联抗体之间。在室温下孵育30分钟后,用水润洗孔以去除未结合的标记抗体。加入TMB试剂溶液,并在室温下孵育20分钟,导致蓝色出现。通过加入停止溶液停止颜色发展,颜色变为黄色,并在450纳米处用分光光度计测量。IgE的浓度与样本的颜色强度成正比。
试剂材料
试剂盒提供的物料:
- 96孔单克隆抗IgE包被微孔板
- 零缓冲液,13 mL
- 酶结合试剂,18 mL
- IgE参考标准品,含有0, 10, 50, 100, 400, 和 800 IU/mL(WHO, 2nd IRP75/502)。液体,每瓶0.5 mL,一套
- 一步法TMB试剂,11 mL
- 停止溶液(1N盐酸),11 mL
试剂盒未提供的物料:
- 精密移液管和移液管头,20 ?L, 100 ?L 和 150 ?L
- 去离子水
- 一次性移液管头
- 漩涡混合器或同等设备
- 吸水纸或纸巾
- 450纳米波长的微孔板读取器,带宽10纳米或更小,光密度范围0-2 OD或更大
- 坐标纸
- 计时器
试剂盒和仪器的储存
收到后未开封的试剂盒应存放在2-8°C的环境中,微孔板应存放在带有干燥剂的密封袋中,以减少潮湿空气的接触。按照上述方法储存,开封后的试剂盒在有效期内保持稳定。450纳米波长下带宽为10纳米或更小,光密度范围为0-2 OD或更大的微孔板读取器适用于吸光度测量。
标准曲线示例:
y轴所示450nm光密度读数的典型标准运行结果与x轴所示IgE浓度一致。此标准曲线仅用于说明,不应用于计算未知量。每个用户在每个实验中都应该获得自己的数据和标准曲线。
ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。
作为ALPCO在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。
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