ALPCO 人类生长激素（HGH）ELISA：优化实验条件以提高灵敏度和特异性

该HGH ELISA用于定量测定人血清中的人类生长激素（HGH）浓度。仅供研究使用。不用于诊断程序。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品人类生长激素（HGH）ELISA。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

人类生长激素（HGH）ELISA检测原理：

这种生长激素（HGH）酶联免疫吸附测定（ELISA）基于固相酶联免疫吸附测定的原理。该测定系统使用羊抗HGH抗体进行固相（微孔板）固定，以及在抗体-酶（辣根过氧化物酶）结合溶液中的小鼠单克隆抗HGH抗体。样本被允许与抗体同时反应，导致HGH分子被夹在固相和酶联抗体之间。在室温下孵育45分钟后，用水润洗孔以去除未结合的标记抗体。加入TMB溶液并孵育20分钟，导致蓝色出现。通过加入1N盐酸停止颜色发展，颜色变为黄色，并在450纳米处用分光光度计测量。HGH的浓度与测试样本的颜色强度成正比。

未提供的材料清单

1. 蒸馏水或去离子水

2. 精密移液管：0.05、0.1、0.2 和 1 mL

3. 一次性移液管头

4. 能够读取450nm吸光度的微孔板读取器

5. 吸水纸

6. 坐标纸

7. 漩涡混合器或同等设备

8. 质量控制材料（例如，BioRad Lyphochek对照血清）

9. 计时器

试剂盒和仪器的储存

收到后未开封的试剂盒应存放在2-8°C的环境中，微孔板应存放在带有干燥剂的密封袋中，以减少潮湿空气的接触。按照上述方法储存，开封后的试剂盒在有效期内保持稳定。微孔板读取器的带宽应为10nm或更小，450nm波长下的光密度范围应为0-2 OD或更大，适用于吸光度测量。

试剂准备

使用前应让所有试剂达到室温（18-25°C）。

测定程序

1. 将所需数量的包被孔固定在支架中。

2. 将50?L的标准品、样本和对照品移液至相应的孔中。

3. 向每个孔中加入100 ?L的酶结合试剂。

4. 彻底混合30秒。这一步完全混合非常重要。

5. 在室温（18-25°C）下孵育45分钟。

6. 将孵育混合物通过甩动板子内容物到废物容器中移除。

7. 用蒸馏水冲洗微孔板5次，并甩动。

8. 将孔猛击在吸水纸或纸巾上，以去除所有残留水滴。

9. 向每个孔中分发100?L的TMB试剂。轻轻混合10秒。

10. 在室温下，避光孵育20分钟。

11. 通过向每个孔中加入100?L的终止液来停止反应。

12. 轻轻混合30秒。确保所有的蓝色完全变为黄色。

13. 在15分钟内使用微孔板读取器读取450nm的吸光度。

结果计算

1. 计算参考标准、对照品和样本的重复组的吸光度平均值（A450）。

2. 通过在坐标纸上绘制每个参考标准的平均吸光度与其浓度（ng/mL）的线性图，构建标准曲线，吸光度在垂直（y）轴上，浓度在水平（x）轴上。

3. 使用每个样本的平均吸光度值，从标准曲线上确定相应的HGH浓度（ng/mL）。

标准曲线示例

下面展示了一个典型的标准运行结果，其中450nm处的光密度读数显示在Y轴上，而HGH（纳克/毫升）显示在X轴上。注意：标准曲线仅供说明之用，不应用来计算未知值。

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。