ALPCO fT3 (Free-Triiodothyronine) EIA* 试剂盒, (96 孔)结果计算方案

用于定量测定人血清中游离三碘甲状腺原氨酸（fT3）浓度。仅供研究使用。不用于诊断程序。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品fT3 (Free-Triiodothyronine) EIA* 试剂盒, (96 孔)。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

fT3 (Free-Triiodothyronine) EIA* 试剂盒, (96 孔)检测原理：

fT3检测是一种固相竞争酶免疫测定法。将血清样本、标准品和T3酶偶联物工作试剂加入涂有单克隆T3抗体的孔中。样品中的游离T3和T3标记的缀合物竞争抗体上的可用结合位点。在室温下孵育60分钟后，用水洗涤孔以去除未结合的T3缀合物。然后加入TMB底物并孵育20分钟，导致蓝色的发展。通过加入停止溶液停止显色，并在450nm处用分光光度法测量吸光度。形成的颜色强度与存在的酶的量成正比，与样品中未标记的fT3的量成反比。通过参考一系列以相同方式测定的fT3标准品，对未知样品中的fT3浓度进行定量。

试剂

试剂盒提供的材料：

- 抗体涂层微孔板（1板，96孔）

  微孔板孔涂有抗T3抗体

- fT3-酶结合物试剂，即用型（1瓶，10.5 mL）

  含有与辣根过氧化物酶结合的T3抗体和防腐剂

- 自由T3参考标准套装（1.0 mL/瓶）

  含有人血清中的0, 0.9, 2.2, 5.0, 9.0 和 19.0 pg/mL的fT3，含防腐剂；液体，即用型。具体水平在批次特定的标签上给出。

- 显色试剂A（1瓶，13 mL）

  含有醋酸缓冲液中的过氧化氢

- 显色试剂B（1瓶，13 mL）

  含有在缓冲溶液中稳定的3,3',5,5'四甲基联苯胺（TMB）

- 停止溶液（3N盐酸）（1瓶，10 mL）

  含有稀释的盐酸

需要但不提供的试剂：

- 能够提供50 ?L体积，精度优于1.5%的移液管

- 能够重复提供50 ?L和200 ?L体积，精度优于1.5%的分配器

- 具有450 nm波长吸收能力的微孔板读取器

- 用于稀释酶结合物和混合显色试剂A与显色试剂B的试管

- 用于吸干微孔板孔的吸水纸

- 计时器

- 质量控制材料

样本收集和准备

应从通过可接受技术获得的全血样本中制备血清。此试剂盒仅用于无添加剂的血清样本。血清样本可在2-8°C下冷藏，最长时间48小时。如果样本无法在48小时内测定，它们可以储存在-20°C下，长达30天。

试剂盒和仪器的储存

未开封的试剂盒在收到后应存放在2-8°C，并应将微孔板保存在带有干燥剂的密封袋中，以尽量减少潮湿空气的接触。按照上述描述储存的开封试剂盒，直到显示的有效期前都保持稳定。在450 nm波长下，具有10 nm或更小带宽和0-2 OD或更大光密度范围的微孔板读取器适用于吸收测量。

标准曲线示例：

结果计算1。计算每组参考标准品、对照品和样品的平均吸光度值（A450）。通过在方格纸上绘制每个参考标准的平均吸光度与其浓度（单位为pg/mL）的关系图，构建标准曲线，吸光度值在垂直轴或Y轴上，浓度在水平轴或X轴上。使用每个样品的平均吸光度值从标准曲线中确定相应的fT3浓度，单位为pg/mL

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

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