ALPCO 超灵敏人生长激素ELISA，精确测量人生长激素

人类生长激素（hGH，也称为生长素）的内分泌系统极为复杂。hGH是位于染色体17上的GH-1基因的产物，在垂体细胞中表达。80%的hGH是一种非糖基化的22千道尔顿（kDa）蛋白质，由191个氨基酸组成。大约20%的hGH是由替代剪接产生的20 kDa的变体形式。此外，还可以在血液循环中发现几种更小的变体，以及翻译后修饰的蛋白质和不同程度的蛋白质聚集。生长激素的生物活性由特定结合蛋白（GHBP）调节，GHBP由细胞膜上的GH受体的细胞外部分形成。这些修饰允许对hGH的半衰期及其生物活性进行严格控制。除了合成和翻译后修饰，hGH的分泌也受到严格调节。自发的脉冲式分泌每3小时发生一次，夜间睡眠期间分泌量最大。生理压力或低血糖等不同因素会导致额外的hGH分泌，这是由下丘脑激素生长抑素和生长激素释放激素（GHRH）诱导的。研究表明，分泌的GH量受到多种因素的影响（参考文献2-5）。

一种用于定量测量血清和血浆（肝素，EDTA）中人类生长激素的酶免疫分析法。仅供研究使用。不用于诊断程序。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品超灵敏人生长激素ELISA。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

超灵敏人生长激素ELISA检测原理：

超灵敏的人类生长激素ELISA是一种夹心测定法。它利用了一种涂在微量滴定板孔上的特异性、高亲和力的多克隆兔抗血清。样品中的hGH与固定化抗血清定量相关。在接下来的步骤中，生物素化抗体与hGH结合。洗涤后，加入链霉抗生物素蛋白-过氧化物酶偶联物，其与抗体的生物素高度特异性结合，并根据样品的hGH水平催化底物定量变色

样本类型

血清和血浆

血清和肝素/EDTA血浆产生可比的值。柠檬酸血浆样本中的hGH水平会降低，因为抗凝剂的量相对较多。除了血清和血浆样本，hGH还可以在其他体液（如尿液和唾液）中测定，在各种人类细胞系的细胞培养上清液中进行研究。此外，这种超敏感hGH ELISA还可以用来测量滤纸上干血斑样本中的hGH，这已经过外部验证（9）。

样本收集

? 研究表明，人类生长激素在日间/夜间呈脉冲式分泌。

? 血液采样应使用标准静脉穿刺。避免溶血样本。

所需样本体积：10 ?L

样本稳定性

在密封样本瓶中：

? 20-25°C下储存：3天

? -20°C下储存：至少2年

在-20°C下储存样本超过2年对结果没有影响。应尽量减少样本的冻结和融化。五次冻融循环对样本没有影响。

样本稀释

? 血清/血浆稀释：用稀释缓冲液DIL稀释1:26

? 在PE/PP管中用移液管取250 ?L稀释缓冲液DIL（在大批量系列中建议使用多步移液器）；加入10 ?L样本（稀释1:26）。混合后在检测中使用2x 100?L的该稀释液。

? 稀释后样本的稳定性：在20-25°C下最多1小时。

? 在血清和血浆以外的样本中，hGH水平可能有很大差异，用户必须自行找到最佳的稀释比例。

干扰

样本中的甘油三酯和胆红素在100 mg/mL和200 ?g/mL的浓度下不会干扰。然而，应由用户验证溶血、脂血或黄疸样本的使用。

试验比较研：

究Langkamp等人将用于人类生长激素测量的内部试验与该试验进行了比较（9）。结果显示了非常好的可比性（见下图）。

文献参考：

1. Hauffa BP, Lehmann N, Bettendorf M, Mehls O, D?rr H-G, Partsch C-J, Schwarz HP, Stahnke N,Steinkamp H, Said E, Sander S, Ranke MB and participating Members of the German KIGS/IGLU StudyGroup (2004); Central reassessment of Growth hormone concentrations measured at local treatmentcenters in children with impaired growth: consequences for patient management. European Journal ofEndocrinology 150: 291 – 297

2. Baumann G (1991); Growth Hormone heterogeneity: Genes, Isohormones, variants and bindingprotein. Endocr Rev 12:424-449

3. Clemmons DR, Chihara K, Freda PU, Ho KKY, Klibanski A, Melmed S, Shalet S, Strasburger CJ,Trainer PJ, Thorner MO (2003); Optimizing control of acromegaly: Integrating a Growth Hormonereceptor antagonist into the treatment algorithm. J Clin Ebdocrinol Metab 88:4759-4767

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

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