ALPCO 酸不稳定亚基ELISA(96孔)检测原理&标准曲线示例

类胰岛素生长因子（IGF）-I和II在循环中与特定的结合蛋白（IGF结合蛋白，IGFBP）结合。到目前为止，已经鉴定出七种不同的蛋白IGFBP-1至7。IGF的生物利用度、运输和储存由这些结合蛋白调节或促进，它们根据生理和发育需求的差异性表达。循环中最丰富的IGFBP是IGFBP-3。与IGFBP-5一起，它能够形成所谓的与IGF和酸性不稳定亚基（ALS）的三元复合物。在循环中，几乎所有的IGF都以这种三元复合物的形式存在，因此不能穿过内皮屏障。只有非常少量的IGF或IGFBP-3存在于这个复合物之外。酸性不稳定亚基是循环中IGF储存机制的重要组成部分。研究表明，在ALS缺乏或ALS基因敲除小鼠中，循环中的IGF和IGFBP-3浓度显著降低，导致生长受损。

酸性不稳定亚基是一种由605个氨基酸组成的前体蛋白。在运输过程中，对于ALS分泌必需的信号肽（AA 1-27）会被切除（Swiss-Prot P35858版本82）。成熟蛋白由578个氨基酸组成，包含约20个富含亮氨酸的序列重复。除了富含亮氨酸的重复序列，还描述了几个潜在的N-糖基化位点。Miller BS等人能够证明IGF、ALS和IGFBP-3的不完全糖基化会导致这些蛋白的血清浓度降低。ALS基因的突变或完全敲除会导致IGF/IGFBP-3缺乏，从而干扰生长。

第一个ALS免疫分析法是由Baxter RC在1990年描述的。使用这种内部放射免疫分析的研究表明，ALS在健康受试者的血清中浓度很高，但在其他体液如羊水、脑脊液或精液中不可检测，尽管这些体液含有高水平的IGFBP-3。

该酶免疫测定试剂盒适用于测量人血清或EDTA/肝素/柠檬酸盐血浆中的酸不稳定亚基（ALS），仅供研究使用。仅供研究使用。不用于诊断程序。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品酸不稳定亚基ELISA(96孔)。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

酸不稳定亚基ELISA(96孔)检测原理：

酸性不稳定亚基（ALS）酶联免疫吸附测定（ELISA）是一种所谓的夹心测定法。它利用两种特异性强、亲和力高的抗体来检测这种蛋白。这些抗体是通过用特定肽段免疫兔子产生的，如Khosravi和Stadler之前所描述的[16, 17]。

样本中的ALS与微孔板上固定的第一抗体结合。接下来的步骤中，生物素标记的第二抗ALS抗体转而与固定的ALS结合。然后，链霉亲和素-过氧化物酶缀合物与生物素标记的抗体结合，在最后的底物反应中，颜色的转变被催化，定量地依赖于样本中ALS的水平。

最初，该测定法是针对内部血清进行校准的，测量结果以mU/mL表示。在成功生产出真核重组ALS后，校准转移到了质量单位（见校准/可追溯性）。此外，重组材料被用来以质量单位量化校准品中的ALS含量。分析显示，1mU ALS相当于5 ng ALS，所有先前的测定法性能描述数据都相应地转换为ng/mL。

典型的标准曲线示例

以下数据仅供展示，不能替代在测定时生成的数据。

文献参考：

1. Ballard. J.. et al.. On the nomenclature of the IGF binding proteins. Acta Endocrinol(Copenh). 1989. 121(5): p. 751-2.

2. Wilson. E.M.. Y. Oh. and R.G. Rosenfeld. Generation and characterization of an IGFBP7 antibody: identification of 31kD IGFBP-7 in human biological fluids and Hs578T humanbreast cancer conditioned media. J Clin Endocrinol Metab. 1997. 82(4): p. 1301-3.

3. Baxter. R.C.. Characterization of the acid-labile subunit of the growth hormone-dependentinsulin-like growth factor binding protein complex. J Clin Endocrinol Metab. 1988. 67(2): p.265-72. 

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。