脂联素是在20世纪90年代初首次被描述为由脂肪细胞产生的内分泌因子。脂联素参与能量和脂肪代谢的调节,因此,其在循环中的浓度被认为可以反映动脉粥样硬化的风险和胰岛素抵抗的程度。基于这些疾病的高发病率,脂联素过去和现在都是关于其背后的生物学机制及其作为生物标志物价值的密集研究对象。老鼠和大鼠是基础研究和临床前研究的合适模型生物。尽管大鼠和人类的可比性有限,我们在下一节提供一些关于人类脂联素生理学的背景信息:
脂联素是一种30kDa的蛋白质,占血清蛋白的0.01%。它主要由脂肪细胞合成,但肌肉细胞和肝细胞也有合成脂联素的能力。到目前为止,IGF-I是已知的唯一能自然诱导脂联素合成的物质。它由一个类似胶原蛋白的N-末端和一个球形的C-末端结构域组成。在体内,脂联素以不同的寡聚体形式出现。存在三聚体、二聚体和高分子量多聚体。到目前为止,已知有两种不同的受体,这两种受体在组织中的表达普遍,尽管在组织中的分布各不相同。脂联素受体1(AdipoR1)可以在肌肉组织中找到,而脂联素受体2(AdipoR2)在肝脏组织中。
脂联素与葡萄糖和脂质代谢有关。研究表明,脂联素与BMI呈负相关,因此它可能对能量代谢有重要性;例如,通过调节脂肪酸的氧化。脂联素水平也与胰岛素抵抗相关,因此它也与2型糖尿病有关。高分子量脂联素已被证明在评估胰岛素抵抗的存在方面具有与总脂联素相似的能力。Blueher等人清楚地证明,就胰岛素抵抗而言,通过全身葡萄糖摄取低于40 ?mol/kg*min测量,使用试剂盒测定的总脂联素具有更大的诊断价值。此外,脂联素还参与炎症过程。它在动脉粥样硬化和冠状动脉炎中很重要,因此血浆中脂联素水平的测定可以用来估计冠状疾病的风险。脂联素还影响其他生理过程,如血管生成。
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脂联素(大鼠)ELISA试剂盒,96孔 | ALP-22-ADPRT-E01 | 查看 |
脂联素(大鼠)ELISA试剂盒,96孔检测原理:
该检测是使用两种特异性、高亲和力抗体的夹心检测。样品中的脂联素与包被在微量滴定板上的第一抗体结合。在接下来的步骤中,第二特异性抗脂联素抗体依次与固定的脂联素结合。第二抗体是生物素化的,将与链霉抗生物素蛋白过氧化物酶偶联物混合使用。在最后一个底物反应中,混合物的颜色将定量地取决于样品中的二连接蛋白水平。
试剂A-F, AK, VP, WP含有作为防腐剂的5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮和2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(<0.015%)。H317 可能会引起皮肤过敏反应。P280 穿戴防护手套/防护服/护目镜/面部保护。P272 受污染的工作服不应带出工作场所。P261 避免吸入粉尘/烟雾/气体/雾气/蒸汽/喷雾。P333+P313 如果发生皮肤刺激或皮疹:寻求医疗建议/注意。P302+P352 如果皮肤沾染:用大量肥皂和水清洗。P501 根据当地/地区/国家/国际法规处置内容物/容器。
底物溶液(S)
TMB底物(S)含有3.3',5.5'四甲基联苯胺(<0.05%)。H315 引起皮肤刺激。H319 引起严重眼部刺激。H335 可能会引起呼吸道刺激。P261 避免吸入粉尘/烟雾/气体/雾气/蒸汽/喷雾。P305+P351+ 如果进入眼睛:用水小心冲洗几分钟。P338 如果容易做到,移除隐形眼镜。继续冲洗。
终止液(SL)
终止液含有0.2 M硫酸(H2SO4)。H290 可能对金属有腐蚀性。H314 引起严重皮肤灼伤和眼损伤。P280 穿戴防护手套/防护服/护目镜/面部保护。P301+P330+ 如果误吞:漱口。P331 不要诱导呕吐。P305+P351+ 如果进入眼睛:用水小心冲洗几分钟。P338 如果容易做到,移除隐形眼镜。继续冲洗。P309+P310 如果暴露或感觉不适:立即呼叫中毒中心或医生/医师。
文献参考:
1. Nakano, Y., et al., Isolation and characterization of GBP28, a novel gelatinbinding protein purified from human plasma. J Biochem (Tokyo), 1996. 120(4): p. 803-12.
2. Pajvani, U.B., et al., Structure-function studies of the adipocyte-secretedhormone Acrp30/adiponectin. Implications for metabolic regulation and bioactivity. J BiolChem, 2003. 278(11): p. 9073-85.
3. Tsao, T.S., et al., Role of disulfide bonds in Acrp30/adiponectin structure andsignaling specificity. Different oligomers activate different signal transduction pathways.J Biol Chem, 2003. 278(50): p. 50810-7.
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