ALPCO高效IVD检测方案：完整甲状旁腺EIA(96孔)，IVD使用

甲状旁腺激素（PTH，Parathyroid hormone, Parathormone, Parathyrin）最初在甲状旁腺中以较大的分子前体形式——前前甲状旁腺激素生物合成，由115个氨基酸组成。在细胞内经过顺序性剪切掉25个氨基酸序列后，前前甲状旁腺激素转化为一个中间产物，即由90个氨基酸组成的多肽，前甲状旁腺激素。通过额外的蛋白水解修饰，前甲状旁腺激素随后转化为甲状旁腺激素，这是一个由84个氨基酸组成的多肽。在健康个体中，甲状旁腺激素的分泌通常通过血清钙对甲状旁腺的负反馈作用进行调节。完整的PTH具有生物活性，并且在循环中非常迅速地清除，半衰期不到四分钟。PTH在甲状旁腺中发生蛋白水解，但主要在外围发生，特别是在肝脏，也在肾脏和骨骼中，产生N-末端片段以及寿命更长的C-末端和中间区域片段。在肾功能不全的个体中，C-末端和中间区域PTH检测通常显示PTH结果升高，这反映了肾脏清除能力受损。

完整PTH ELISA用于定量测定人血清中的完整PTH（甲状旁腺激素）。该试验旨在用于美国的体外诊断。

艾美捷完整甲状旁腺EIA(96孔)，IVD使用（ALP-21-IPTHU-E01）检测原理：

完整PTH免疫测定是一种双位点ELISA[酶联免疫吸附测定]，用于测量PTH的生物完整84个氨基酸链。通过亲和层析纯化了两种不同的山羊多克隆抗人PTH抗体，使其对PTH分子上明确界定的区域具有特异性。生物素化的捕获抗体仅结合中间区域和C末端PTH 39-84。辣根过氧化物酶标记的检测抗体仅结合N端PTH 1-34。

完整的PTH 1-84通过与生物素标记的捕获抗体和HRP标记的检测抗体结合，形成检测所需的夹心复合物。生物素标记的抗体和包被链霉亲和素的微孔板的容量都经过调整，以显示出即使在非常高的水平下，对非活性片段的干扰也是微不足道的。

在这个测定中，校准品、对照品或患者样本与酶标记的抗体和生物素偶联的抗体一起在包被链霉亲和素的微孔板孔中同时孵育。在测定孵育结束时，微孔板被洗涤以去除未结合的成分。洗涤后，微孔板与底物四甲基联苯胺（TMB）一起孵育。在HRP酶的存在下，TMB底物转化为蓝色。然后添加酸性停止溶液以停止反应，并将颜色变为黄色。黄色的强度与样本中完整PTH的浓度直接成正比。使用从校准品获得的结果生成吸光度单位与浓度的剂量反应曲线。对照品和患者样本中存在的完整PTH的浓度直接从这个曲线上确定。

完整甲状旁腺EIA(96孔)，IVD使用试剂盒组成：

样本收集和储存：

完整PTH的测定应使用人类血清进行。为了双重测定样本，需要50微升的血清。收集不含抗凝剂的全血。在血液凝固后，应尽快分离出血清，最好在冷藏离心机中进行，并尽快进行测试。如果血清样本不能立即进行测试，应储存在-20°C或更低温度下。在-20°C下冷冻的血清样本可稳定保存长达4个月。

完整甲状旁腺EIA(96孔)，IVD使用文献参考：

1. Segre, G.V., Niall H.D., Habener J.F. et. al.: Metabolism of parathyroid hormone: physiological andclinical significance. Am. J. Med. 56: 774,1974.

2. Mallete, L.E., Gagel, R.F.: Parathyroid Hormone and Calcitonin. In: Murray J.F. (ed) Primer on theMetabolic Bone Diseases and Disorders of Mineral Metabolism. American Society for Bone andMineral Research, Kelseyville; William Byrd Press, Richmond, pp. 65-69, 1990.

3. Bilezikian, J.P.: Primary Hyperparathyroidism. In: Murray J.F. (ed) Primer on the Metabolic BoneDiseases and Disorders of Mineral Metabolism. American Society for Bone and Mineral Research,Kelseyville; William Byrd Press, Richmond, pp. 109-111, 1990.