ALPCO 胰岛细胞Ab (ICA) EIA(96孔)，优化的实验设计和操作流程

ICA（胰岛细胞抗体）ELISA是一种定性ELISA检测，用于检测针对胰岛细胞抗原的循环IgG抗体。此试剂盒仅供研究使用，不用于诊断程序。

依赖胰岛素的糖尿病（IDDM）或1型糖尿病是一种使人衰弱的慢性疾病，它损害了关键激素胰岛素的产生和分泌，并改变了血糖代谢。胰岛素是由胰岛细胞或兰格汉斯岛（1）合成和分泌的。在IDDM中，胰岛素合成的中断是由自身抗体对胰岛细胞的免疫破坏引起的（2-4）。这种异常（自身免疫）可能是遗传的和/或由接触有毒化学物质、病毒感染以及各种形式的压力触发的（5）。研究表明，IDDM有一个特征性的无症状糖尿病前期，可能持续数年。在这段时间里，研究表明受影响的个体在对静脉/口服葡萄糖挑战的反应中表现出胰岛素早期释放的减少。在大多数情况下，这些个体携带循环的胰岛细胞自身抗体（ICA）和/或胰岛素自身抗体（IAA）。研究表明，ICA可以在IDDM发病前8年就被检测到（6），因此可能作为疾病的早期指标或对疾病的易感性。ICA阳性的个体可能会显示出胰岛细胞功能的逐渐丧失，这表明早期胰岛素释放的中断。研究表明，当这种早期胰岛素释放完全停止时，明显的IDDM就会发展（6）。在最近发病的IDDM个体中，70%存在胰岛细胞自身抗体（13,14），而对照非糖尿病人群的这一比例为0.1-0.5%（11,15）。ICA也在IDDM个体的一级亲属中被检测到。这些个体构成了人类人群中有高风险发展IDDM的群体。一些研究报告称，IDDM个体的ICA阳性一级亲属随后发展为糖尿病（16-19）。其他研究也表明，血清ICA和IAA的存在是发展IDDM可能性增加的指标（3,6-12）。因此，ICA的血清学检测可能是研究IDDM发展的有力工具。这些自身抗体作为IDDM标志物的研究意义也体现在它们存在于最终发展为IDDM的非糖尿病个体中。Riley等人最近报告称，在2型糖尿病患者中测定ICA可以识别IDDM的发病前并预测对胰岛素治疗的需求（20）。研究表明，携带血清ICA的2型糖尿病患者可能会恶化为胰岛素依赖。目前，血清ICA是通过间接免疫荧光和组织化学方法测定的，这些方法使用冷冻未固定的人类/灵长类动物或啮齿动物胰腺切片作为底物。尽管自1974年最初描述以来，人们尝试了各种改进和修改这一程序（22,23），但间接免疫荧光/组织化学技术存在固有的方法学问题。技术的标准化证明非常困难。这种“冷冻切片”技术的可靠性受到从一个胰腺到另一个胰腺的变化、不可避免地需要未固定的胰腺组织以及适当组织不常见的可用性等因素的影响。ICA（胰岛细胞抗体）ELISA使用一组纯化的胰岛细胞特异性抗原在微孔板ELISA程序中检测血清ICA的存在。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品胰岛细胞Ab (ICA) EIA(96孔)。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

胰岛细胞Ab (ICA) EIA(96孔)检测原理：

一种纯化的胰脏抗原混合物被固定在微孔板上。在孵育期间，血清样本中的抗体被允许在室温下与微孔板上的抗原分子反应。洗涤掉多余的/未结合的血清物质后，添加一种酶（碱性磷酸酶）标记的山羊抗体，该抗体特异性结合人类IgG，加入到抗原-抗体复合物中。经过再次彻底洗涤后，加入底物（PNPP），并使用分光光度计测量产生的色素。色素的强度与样本中ICA的浓度成正比。ICA阳性对照作为内部质量控制，确保结果的有效性。

试剂盒中提供的所有试剂仅供研究使用。

1. 潜在生物危害材料

校准品和对照品的基质是人血清。所用的人血清在使用FDA许可的试剂进行测试时，被发现对HBsAg、抗HIV 1/2和抗HCV无反应。由于没有任何测试方法可以完全保证HIV、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒或其他传染性病原体的缺失，因此应将这些试剂视为潜在的传染性物质进行处理。

2. 叠氮化钠

一些试剂含有作为防腐剂的叠氮化钠。叠氮化钠可能与管道中的铅、铜或黄铜发生反应，形成爆炸性的金属叠氮化物。在处理这些材料时，总是要用大量的水冲洗，以防止叠氮化物积累。

3. 终止液

终止液由1N氢氧化钠组成。这是一种强碱，应谨慎处理。它可能导致灼伤，处理时应戴手套。戴上眼部保护和适当的防护服。避免吸入。在用纸巾吸收之前，用水稀释泄漏物。

4. 底物溶液

底物溶液由对硝基苯磷酸酯（PNPP）组成，这是一种在本ELISA中使用的非蛋白色素原底物。偶尔底物可能会呈现黄色。这种颜色不会干扰检测结果。

预防措施

1. 不要冷冻测试试剂，始终将所有试剂盒组分存放在2-8°C的环境中。

2. 每次进行检测时，都必须运行阳性和阴性对照。

3. 只使用清晰的血清作为测试样本。测试样本不应有严重的浑浊、溶血或微生物污染。

4. 所有样本都应进行双重分析。

5. 不要混合不同批次的试剂。

6. 不要使用过期的试剂。

7. 不要让试剂在室温下长时间放置。

8. 不要让底物溶液暴露在光线下。

9. 为了获得可重复和准确的结果，需要精确的移液技术。

文献参考：

1. Orci, L., J. Vassali, and A. Parrelet (1988). The insulin factory. Sci. Amer., 261:85-94.

2. Eisenbarth, G.S. (1985). Type I diabetes: A ch ronic autoimmune disease. New Engl. J.Med., 314:1360-1368.

3. Eisenbarth, G.S., J. Connelly, and J.S. Soeldner (1987). The natural hist ory of Type Idiabetes. Diabet./Metab. Rev., 3:873-891.

4. Etzioni, A. (1987). Immunological concepts i n insulin-dependent (Type I) DiabetesMellitus Immunol Res., 6:224-251.

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。