TGF-β2 ELISA是一种酶免疫测定法,用于定量测定血清、血浆和细胞培养上清液中的TGF-β2。
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TGF-β2 ELISA | ALP-20-TGF2HU-E01 | 查看 |
TGF-β2 ELISA检测原理:
TGF-β2 ELISA试剂盒是一种基于夹心原理的固相酶联免疫吸附测定(ELISA)。在测试之前,标准品和样本在测定缓冲液中稀释,用盐酸酸化,然后用氢氧化钠中和。
之后,将中和后的标准品和样本加入到涂有抗体(多克隆)的微孔板孔中。第一次孵育后,通过洗涤去除未结合的样本材料。然后依次孵育生物素标记的小鼠抗TGF-β2抗体和链霉亲和素-HRP酶复合物。形成一个免疫酶夹心复合物。
孵育后,洗去未结合的结合物。加入底物溶液后,产生的颜色强度与样本中TGF-β2的浓度成正比。
提供的试剂:
- 微孔板,12x8(可拆分)条,96孔;孔涂有抗TGF-β2抗体(多克隆)。
- 标准品(库存标准品),1瓶,2 mL,浓度:1000 pg/mL,见“试剂准备”。* 含有<0.015% BND和<0.010% MIT作为防腐剂。
- 测定缓冲液,10倍浓缩,1瓶,10 mL,浓度:0 pg/mL,见“试剂准备”。* 含有0.015% BND和0.010% MIT作为防腐剂。
- 酶结合物,1瓶,11 mL,即用型,小鼠抗TGF抗体结合到生物素。* 含有0.03% Proclin 300,0.015% BND和0.010% MIT作为防腐剂。
- 酶复合物,1瓶,11 mL,即用型,链霉亲和素过氧化物酶。* 含有0.03% Proclin 300,0.015% BND和0.010% MIT作为防腐剂。
- 底物溶液,1瓶,14 mL,即用型,四甲基联苯胺(TMB)。
- 停止溶液,1瓶,14 mL,即用型,含有0.5M H2SO4,避免与停止溶液接触,它可能会引起皮肤刺激和灼伤。
- 洗涤溶液,1瓶,30 mL(40倍浓缩),见“试剂准备”。
- 1 M HCl,1瓶,2 mL,即用型,用于样本的酸化。
- 1 M NaOH(中和缓冲液),1瓶,2 mL,即用型,用于中和。
* BND = 5-溴-5-硝基-1,3-二氧六环 MIT = 2-甲基-2H-异噻唑-3-酮
注意:如有需要,可提供额外的测定缓冲液用于样本稀释。
一般说明:
- 使用前,所有试剂和样本必须放置至室温。所有试剂混合时必须避免产生泡沫。
- 一旦测试开始,应不间断地完成所有步骤。
- 为了避免交叉污染,每个标准品、对照品或样本使用新的一次性塑料移液管尖嘴吸头。
- 吸光度是孵育时间和温度的函数。在开始测定之前,建议所有试剂都已准备好,瓶盖已移除,所有需要的孔都固定在架上等。这将确保每个移液步骤的间隔时间相等,无中断。
- 作为一般规则,酶促反应与时间和温度成线性关系。
文献参考:
1. Lawrence Da. Transforming growth factor-beta: An overview. Kidney Int 1995;47:S19-S23.
2. Roberts AB, Sporn MB. the transforming growth factor-beta. In: Sporn MB, Roberts AB., eds. Peptidegrowth factors and their receptors. Handbook of experimental pharmacology, Heidelberg: Springer Verlag,1990:419-472.
3. Muller F, Aukrust P, Nilssen DE, Froland SS. Reduced serum level of transforming growth factor-beta inpatients with IgA deficiency. Clin Immunol Immunopathol 1995,76:203-208.
ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。
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