ALPCO 黄体生成素(尿)酶联免疫吸附测定(96孔)IVD使用

Leutenizing Horome（LH）ELISA是一种酶免疫测定法，用于定量检测尿液中的LH。该测试用于检测中期LH激增尿蛋白，这有助于预测排卵时间。用于美国境内的体外诊断。仅供美国境外研究使用。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品黄体生成素(尿)酶联免疫吸附测定(96孔)IVD使用。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

黄体生成素(尿)酶联免疫吸附测定(96孔)IVD使用检测原理：

LH ELISA试剂盒是一种基于夹心原理的固相酶联免疫吸附测定（ELISA）。微孔板的孔中涂有针对LH分子β亚单位的独特抗原位点的单克隆（小鼠）抗体。在第一次孵育期间，添加的样本中的LH分子的β亚单位与固定的抗体结合。孵育后，加入的结合物溶液（含有与辣根过氧化物酶结合的抗LH抗体）与LH结合，形成一个夹心复合物。经过洗涤步骤去除所有未结合的物质后，固相与底物溶液孵育。通过加入停止溶液来突然停止比色反应，测量产生的黄色产物的光密度（OD）。颜色的强度与样本中分析物的浓度成正比。通过绘制标准品浓度对应的OD值来构建标准曲线，并使用这个标准曲线来确定未知样本的浓度。

测定程序：

每次运行都必须包括一个标准曲线。

1. 在框架支架中固定所需数量的微孔板孔。

2. 使用新的一次性吸头，将每个标准品、对照品和样本的50微升分别加入相应的孔中。

3. 在室温下孵育30分钟。

4. 向每个孔中加入100微升酶结合物。彻底混合10秒钟。这一步完全混合非常重要。

5. 在室温下孵育30分钟。

6. 迅速摇出孔内的内容。手动洗涤时，每个孔用300微升1倍工作洗液洗涤3次。在吸水纸上用力敲击孔以去除残留液滴。重要说明：正确的洗涤显著影响此测定的灵敏度和精确度！

7. 向每个孔中加入100微升底物溶液。

8. 在室温下孵育10分钟。

9. 通过向每个孔中加入50微升停止溶液来停止酶促反应。

10. 使用微孔板读数器，在450纳米（读数）和620纳米至630纳米（背景减除，推荐）测定每个孔的吸光度（OD）。建议在加入停止溶液后10分钟内读取孔。

结果计算：

1. 计算每组标准品、对照品和样本的平均吸光度值。

2. 使用半对数坐标纸，通过将每个标准品的平均吸光度与其浓度绘制在垂直（Y）轴上的吸光度和水平（X）轴上的浓度上，构建标准曲线。

3. 使用每个样本的平均吸光度值，从标准曲线上确定相应的浓度。

4. 自动化方法：IFU中的结果已经使用4-PL（4参数逻辑）曲线拟合自动计算。4参数Rodbar或4参数Marquardt Logistics是首选方法。其他数据简化函数可能会给出略有不同的结果。

样品的浓度可以直接从该标准曲线上读取。浓度高于最高标准的样品必须进一步稀释或报告为>200 mIU/mL。在计算浓度时，必须考虑该稀释系数。

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

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