ALPCO 人胎盘催乳素（HPL）ELISA检测原理&结果计算方案

人胎盘催乳素ELISA是一种酶免疫测定法，用于定量测定血清中的人胎盘催乳素（hPL）。仅供研究使用。不适用于独立程序

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品人胎盘催乳素（HPL）ELISA。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

人胎盘催乳素（HPL）ELISA检测原理：

hPL ELISA试剂盒是基于上述原理的固相酶联免疫吸附试验（ELISA）。微量滴定孔涂有针对hPL分子独特抗原位点的单克隆[小鼠]抗体。将含有内源性hPL的样品等分试样与酶偶联物在包被孔中孵育，酶偶联物是一种与辣根过氧化物酶偶联的抗hPL抗体。孵育后，洗掉未结合的结合物。结合的过氧化物酶的量与样品中hPL的浓度成正比。加入底物溶液后，显色强度与样品中hPL的浓度成正比。

检测程序注意事项：手动移液：建议每次检测运行不要使用超过32个孔。所有标准品、样本和对照品的移液应在3分钟内完成。自动移液：每次检测运行可以使用96孔的完整板。然而，建议所有标准品、样本和对照品的移液在3分钟内完成。每次运行必须包括一个标准曲线。

1. 在架子上固定所需数量的微孔板孔。

2. 使用新的一次性吸头，向适当的孔中分别加入10 ?L的标准品、对照品和预稀释样本。

3. 向每个孔中加入100 ?L的酶结合物。彻底混合10秒钟。这一步完全混合非常重要。

4. 在室温下孵化30分钟。

5. 迅速摇动孔内液体。用蒸馏水（每个孔300 ?L）冲洗孔5次。在吸水纸上用力敲击孔以去除残留液滴。重要注意事项：洗涤程序的正确执行对本检测的灵敏度和精确度有很大影响！

6. 向每个孔中加入100 ?L的底物溶液。

7. 在室温下孵化10分钟。

8. 通过向每个孔中加入50 ?L的终止液来停止酶促反应。

9. 使用微孔板读取器，在450 ± 10 nm处测定每个孔的吸光度（OD）。建议在加入终止液后10分钟内读取孔。

结果计算

1. 计算每组标准品、对照品和样本的平均吸光度值。

2. 使用半对数坐标纸，通过将每个标准品的平均吸光度与其浓度绘制在图表上，吸光度值在垂直（Y）轴上，浓度在水平（X）轴上，构建标准曲线。

3. 使用每个样本的平均吸光度值，从标准曲线上确定相应的浓度。

4. 自动方法：使用说明书中的结果已使用4参数曲线拟合自动计算。（首选4参数Rodbard或4参数Marquardt方法。）其他数据简化功能可能会给出略有不同的结果。

5. 样本的浓度可以直接从这个标准曲线上读取。浓度高于最高标准品的样本必须进一步稀释或报告为> 20 mg/L。在计算浓度时，必须考虑这个稀释因子。

结果的可靠性

测试必须严格按照制造商的使用说明进行。此外，用户必须严格遵守GLP（良好实验室规范）或其他适用的国家标准和/或法律。这对于使用对照试剂尤为重要。在测试程序中始终包含足够数量的对照对于验证测试的准确性和精确性是重要的。只有在所有对照都在指定范围内，且所有其他测试参数也在给定的测试规格内时，测试结果才有效。如有任何疑问或担忧，请联系ALPCO。

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。