肾上腺素ELISA是一种用于定量测定人尿中肾上腺素的竞争性ELISA。仅供研究使用。不用于诊断程序。
作为ALPCO在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品变肾上腺素ELISA。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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变肾上腺素ELISA | ALP-17-MTPHU-E01 | 查看 |
变肾上腺素ELISA检测原理:
在样品制备过程中,肾上腺素(甲肾上腺素)被定量酰化。随后的竞争性ELISA使用微量滴定板格式。抗原与微量滴定板的固相结合。酰化标准品、对照品和样品以及固相结合分析竞争固定数量的抗体结合位点。系统达到平衡后,通过洗涤去除游离抗原和游离抗原抗体复合物。使用TMB作为底物,通过抗兔IgG-过氧化物酶偶联物检测与固相结合的抗体。在450nm处监测反应。未知样品的定量是通过将其吸光度与用已知标准浓度制备的参考曲线进行比较来实现的。本试剂盒中使用的抗肾上腺素抗体仅识别生物相关的肾上腺素L型。市售的合成肾上腺素总是D型和L型的混合物。两种形式之间的比例因批次而异。如果使用合成肾上腺素来富集天然样品,这具有重要意义。由于使用该试剂盒只能检测到约50%的合成肾上腺素(Lportion),因此加标样本将被低估。因此,应使用仅含有L型的天然样品。
警告和预防措施:
1. 此试剂盒仅供专业使用。用户应充分理解本协议以成功使用此试剂盒。只有随试剂盒提供的测试说明是有效的,必须使用它来运行检测。只有通过严格和仔细遵循所提供的说明,才能获得可靠的性能。
2. 必须遵循良好实验室规范(GLP)的原则。
3. 为减少接触潜在有害物质的风险,必要时请穿戴实验室外套、一次性防护手套和防护眼镜。
4. 所有试剂盒试剂和样本在使用前应恢复至室温,并轻轻但彻底地混合。避免试剂和样本的反复冻融。
5. 用于稀释或重组的,请使用去离子水、蒸馏水或超纯水。
6. 微孔板包含可拆卸条带。未使用的孔位必须在密封的箔袋中与干燥剂一起存放在2°C至8°C,并在使用提供的框架内使用。
7. 强烈推荐对样本进行双重测定,以便能够识别潜在的移液误差。
8. 一旦测试开始,所有步骤都应不间断地完成。确保所需的试剂、材料和设备在适当的时间准备就绪。
9. 孵化时间确实会影响结果。所有孔位应以相同的顺序和时间间隔处理。
10. 为避免试剂交叉污染,请使用新的一次性移液管头分配每种试剂、样本、标准品和对照品。
11. 每次运行都必须建立标准曲线。
12. 每次运行中都应包括对照品,并且应落在既定的置信限内。置信限列在QC报告中。
13. 不要在测试中混合不同批号的试剂盒组分,并且不要使用超出试剂盒标签上所示过期日期的试剂。
14. 避免接触含有0.25 M硫酸的停止溶液。它可能会引起皮肤刺激和灼伤。如果与眼睛或皮肤接触,请立即用水冲洗。
15. TMB底物对皮肤和粘膜有刺激性。如果可能接触,请用大量水冲洗眼睛,用肥皂和大量水清洗皮肤。在使用前清洗受污染的物品。
16. 有关试剂盒中包含的有害物质的信息,请参考安全数据表(SDS)。该产品的安全数据表可由制造商的网站直接获取,也可应要求提供。
典型标准曲线
示例而已,请勿用于计算!
文献参考:
1. Parrott et al. Urinary corticosterone and normetanephrine levels after voluntary wheel and forcedtreadmill running in the db/db mouse. Journal of Diabetes Mellitus, 1(4):71-78 (2011)
2. Petramala et al. Multiple Catecholamine-Secreting Paragangliomas: Diagnosis after HemorrhagicStroke in a Young Woman. Endocrine Practice, 14(3):340-346 (2008)
3. Sato et al. Central control of bone remodeling by neuromedin U. Nature Medicine, 13:1234-1240(2007)
ALPCO产品种类多样,可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等,涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域,尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。
作为ALPCO在中国区域的代理,艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。
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