ALPCO 游离睾酮LIA, 96孔，高效诊断工具

用于通过发光免疫法直接定量测定人血清中的游离睾酮。

作为ALPCO在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐ALPCO热销产品游离睾酮LIA, 96孔。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

游离睾酮LIA, 96孔试验原理：

以下化学发光免疫测定的原理遵循典型的竞争性结合场景。未标记的抗原（存在于校准品、对照品和患者样本中）和酶标记的抗原之间发生竞争，争夺微孔板上有限数量的抗体结合位点。洗涤和滗析程序可以去除未捆绑的材料。在洗涤步骤之后，加入发光基板。相对发光（RLU）在微量滴定板光度计上测量。RLU值与样品中游离睾酮的浓度成反比。使用一组校准器绘制标准曲线，从中可以直接读取患者样本和对照中游离睾酮的量。该检测系统中使用的标记睾酮（结合物）对SHBG和人血清白蛋白没有结合特性。使用低结合能力（Keq x浓度）的高度特异性兔抗睾酮多克隆抗体来最小化睾酮蛋白平衡的干扰。测试系统中的其他组件也经过优化，不会改变原始的游离睾酮浓度。

临床应用

睾酮是一种C-19类固醇，男性由睾丸和肾上腺皮质分泌，女性则由肾上腺皮质和卵巢分泌。睾酮也可以由外周组织从雄烯二酮转化而来，这在男性中生理意义不大。然而，在女性中，大约一半的循环睾酮来源于此。睾酮测量主要用于男性性腺功能减退和女性高雄激素状态的临床评估。睾酮在血液中与三种蛋白质结合：性激素结合球蛋白（60-80%）、白蛋白和皮质醇结合球蛋白。只有大约1-2%的总循环睾酮保持未结合或游离状态。尽管仍在研究之中，但大多数研究者接受游离睾酮测定作为生物活性部分的衡量标准。推荐测定游离睾酮以克服运输蛋白变化对总睾酮浓度的影响。

测定程序

重要提示：

- 使用前所有试剂必须达到室温。

- 校准品、对照品和样本应以双份进行测定。

- 一旦开始程序，所有步骤都应连续完成，不得中断。

1. 准备游离睾酮-HRP结合物、洗涤缓冲液和LIA底物的1X工作溶液（参见提供的试剂和准备部分）。

2. 取出所需的孔条数量。重新密封袋子，并将任何未使用的孔条放回冷藏。

3. 向相应标记的孔中分别准确移液25 μL的每种校准品、对照品和样本（建议使用多通道移液管）。

4. 向每个孔中准确移液100 μL的结合物工作溶液。（建议使用多通道移液管）。

5. 覆盖板子，然后在37°C下孵育板子1小时。

6. 用稀释后的洗涤缓冲液每个孔300 μL洗涤孔3次，并用吸水纸牢固拍打板子以确保其干燥。（建议使用洗涤器）。

7. 用每个孔300 μL的冲洗液再次洗涤孔3次，并用吸水纸牢固拍打板子以确保其干燥。

8. 向每个孔中准确移液130 μL的LIA工作底物溶液。（建议使用多通道移液管）。

9. 在加入底物后10-30分钟内，在微孔板化学发光仪上测量每个孔的相对发光单位（RLUs）。

典型校准器曲线

仅示例曲线。请勿用于计算结果。

文献参考：

1. Winter SJ, et al. The Analog Free Testosterone Assay: Are the Results in Men ClinicallyUseful. Clin Chem. 1998; 44(10):2178–82.

2. Ooi DS, et al. Establishing Reference Interval for DPC’s Free TestosteroneRadioimmunoassay. Clin Biochem. 1998; 31(1):15–21.

3. Marcus GJ, Dumford R. A Simple Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for Testosterone.Steroids. 1985; 46:975–86.

4. Joshi UM, et al. A Sensitive Specific Enzyme Immunoassay for Serum Testosterone.Steroids. 1979; 34(1):35–46.

ALPCO产品种类多样，可测样品来源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、猪、羊、狗、猴等，涉及神经生物学、骨代谢、心血管疾病和氧化应激、细胞因子与信号转导、糖尿病和肥胖症、内分泌学、甲状腺功能、肠胃病学、免疫学、生殖激素、抗体和抗原、分子诊断等多个研究领域，尤以糖尿病和肥胖症研究领域见长。

作为ALPCO在中国区域的代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的ALPCO产品。