人类抗水疱性口炎病毒(印第安纳州)糖蛋白(VSVIG)IgG ELISA试剂盒是一种免疫测定试剂盒适用于定量VSVIG特异性IgG抗体活性接种疫苗、免疫和/或感染者的血清或血浆中人类。该免疫测定适用于:
o确定相对于非免疫的免疫状态控制
o评估疫苗的疗效,包括剂量,佐剂、免疫途径和时间
o鉴定和标准化疫苗批次和方案
该测定仅供研究使用(RUO),不打算也未被验证用于诊断VSV疾病。试剂不含病毒或病毒抗原。
作为Alpha Diagnostic International(ADI)在中国的区域总代理,艾美捷科技强烈推荐Alpha Diagnostic International(ADI)热销产品人抗 VSV 印第安纳糖蛋白 (GP) 抗体 (VSVIG) IgG ELISA 试剂盒,96 次检测,定量方案。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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人抗 VSV 印第安纳糖蛋白 (GP) 抗体 (VSVIG) IgG ELISA 试剂盒,96 次检测,定量方案 | ADI-AE-327310-1 | 查看 |
人抗 VSV 印第安纳糖蛋白 (GP) 抗体 (VSVIG) IgG ELISA 试剂盒,96 次检测,定量方案检测原理:
抗VSVIG IgG/IgM ELISA试剂盒基于样品中纯化的重组抗体(IgG/IgM)VSVIG抗原固定在微孔上。结合抗体通过抗人IgG或IgM-HRP缀合物检测。a之后洗涤步骤,加入显色底物(TMB)并着色由HRP底物开发,与HRP底物成正比与样品中存在的抗VSVIG IgG或IgM的量有关。加入终止溶液以终止反应,以及然后使用ELISA阅读器在以下位置测量吸光度450nm。样本中抗体(IgG/IgM)的存在相对于抗VSVIG IgG/IgM校准品测定控制。
检测设计和设置
样本收集和处理
可以使用经过适当稀释的血清和其他生物液体作为样本,以避免溶液基质干扰。对于血清,通过静脉采血,让血液凝固,并通过室温离心分离血清。如果样本不会立即检测,可以冷藏保存几周,或冷冻长期保存。
抗体稳定性与稀释
建议将血清初步稀释到工作样品稀释液(WSD)中以稳定抗体活性。这增强了可重复的取样,并在冷藏或冷冻保存下,使抗体活性稳定多年。进一步稀释到低非特异性结合(NSB)样品稀释液(LNSD)中,应至少是初始稀释的10倍,并在检测当天进行。
示例:初始(1/5):10ul血清 + 40ul WSD [或0.1ml + 0.4ml]
进一步(1/50):10ul初始(1/5)+ 90ul LNSD(1/50)
检测设计
在继续之前,先回顾结果解释(第5-7页):
? 选择适当的样本稀释,考虑到预期的阳性效力和最小化非特异性结合(NSB)和其他基质效应;例如,非免疫样本的净信号应低于1 U/ml校准品。这通常是人血清中IgG和IgM正常水平的1:100或更高稀释。
? 运行抗VSVIG阳性对照;值范围在瓶标签上
? 运行一个样品稀释液空白。这个信号是检测性能的指标,特别是洗涤效率,并且用于净OD计算,如果需要的话。空白OD应小于0.3。
? 运行一组校准品,验证检测是否按照规格执行:10 U/ml应给出高信号(>1.5 OD);1 U/ml应给出低信号,可用于区分阳性/阴性阈值(见结果解释,第5页)。
板设置
将所有试剂预热至室温(18-30°C)平衡(至少30分钟)。
? 确定检测运行的孔数。
推荐包括8个校准孔和每个待检测样本对照的2个孔进行复制。
? 从袋中取出适当数量的微孔条,并把未使用的条放回袋中。重新密封袋并冷藏保存。
? 向每个孔中加入200-300ul工作洗涤液,并让其静置约1-5分钟。在加入样本前,抽吸或倾倒液体并在纸巾上拍干。
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