通用术语“自噬”包括溶酶体获得细胞溶质货物的几个过程,文献中发现了三种类型的自噬:(1)巨自噬,其特征在于形成新月形结构(吞噬团),该结构膨胀形成双膜自噬体,能够与溶酶体融合;(2)微自噬,其中溶酶体内陷并直接螯合胞质成分;(3)伴侣介导的自噬(CMA),涉及未折叠蛋白在溶酶体膜上的易位。
自噬途径的上调是对细胞外或细胞内应激和信号(如饥饿、生长因子剥夺、ER 应激和病原体感染)的反应。这些途径的故障与各种人类病理有关,包括癌症、神经变性和传染病。
选择性巨自噬描述了整个细胞成分、蛋白质聚集体或异常长寿命蛋白质的自我降解途径;其中双膜自噬体螯合细胞器、泛素化蛋白或泛素化蛋白聚集体,随后与溶酶体融合,通过常驻水解酶分解。蛋白质聚集体的自噬清除需要泛素结合受体p62和NBR1。
p62蛋白,也称为隔离体1(SQSTM1),具有双重功能,既是支架蛋白,又有助于运输蛋白质降解。它可以通过PB1(Phox和Bem1)结构域聚合并与NBR-1结合,通过UBA(泛素相关)结构域与泛素化蛋白质相互作用,将它们连接到自噬机制,并通过LIR(LC3相互作用区)基序与自噬途径的LC3II蛋白结合。p62通过促进泛素蛋白的自噬降解,减少细胞内错误折叠和非功能蛋白质的聚集,从而增强细胞存活特征,从而在泛素-蛋白酶体系统(UPS)和自噬之间提供关键联系。由于p62在自噬被抑制时积累,并且在诱导自噬时可以观察到水平降低,因此p62可用作研究自噬通量的生物标志物。此外,p62已在神经退行性疾病(如帕金森氏症和阿尔茨海默氏症)以及骨骼疾病佩吉特骨病中实施,将p62蛋白确立为潜在的治疗靶点。
作为Enzo全国总代理,艾美捷科技强烈推荐Enzo热销产品p62 ELISA kit。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
产品名称 | 货号 | 详情 |
p62 ELISA kit | ADI-900-212-0001 | 查看 |
p62 ELISA kit参数详情:
替代名称:隔离体 1
敏感性:100pg/ml(范围 625 - 40,000pg/ml)
检测时间:3小时
应用:酶联免疫吸附法,比色检测
应用说明:用于定量测定细胞裂解物样品中的人、大鼠和小鼠p62。引用的样品类型包括在PBMC裂解物中。
波长:450 纳米
物种反应性:人类, 老鼠, 大鼠
交叉反应性:无交叉反应。
使用/稳定性:将所有组件储存在 +4?C 下,标准组件在 -80?C 下储存。
航运:干冰
内容:微量滴定板、抗体、偶联物、测定缓冲液 13、洗涤缓冲液浓缩物、标准品、TMB 底物、终止液 2、RIPA 细胞裂解缓冲液 2
p62(产品编号ADI-900-212)和NBR1(产品编号ADI-900-211)免疫测定与自噬诱导的相关性。MDA-MB-231人乳腺癌细胞用2μM自噬诱导药物withaferin A(WA)处理。在处理后6、12和24小时收获细胞,并在含有蛋白酶抑制剂和DNA酶的RIPA细胞裂解缓冲液2中裂解。通过离心澄清细胞裂解物,并在p62测定(图3A)和NBR1测定(图3B)中进行分析。抗原浓度归一化为总细胞蛋白。通过SDS-PAGE分离细胞裂解物,并使用来自细胞信号的抗p62抗体CN #5114(图3C)或来自细胞信号的抗LC3抗体CN #2775(图3D)通过蛋白质印迹进行分析。将两种蛋白质印迹中的信号强度与肌动蛋白水平进行比较,条带以上的数字表示蛋白质水平相对于相应DMSO处理的对照的变化。
特点:
高灵敏度检测,可测量低至 100 pg/ml 的 p62
全定量结果优于半定量蛋白质印迹分析
更高的通量形式,可在短短 40 小时内检测多达 3 个样品一式两份
易于使用的液体颜色编码试剂可减少错误
Enzo Life Sciences, Inc.是研究和诊断市场中标记和检测技术领域公认的领导者。提供蛋白质、抗体、肽、小分子、标记探针染料和试剂盒组合等产品线,为生命科学研究/生物制药提供用于目标识别/验证、高含量分析、基因表达分析、核酸检测、蛋白质生物化学检测以及细胞分析的诸多工具。
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