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小鼠IgM ELISA试剂盒典型结果数据计算方案

发布者:艾美捷科技    发布时间:2024-10-31     
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小鼠IgM ELISA试剂盒是一种体外免疫测定法,用于定量体内循环的IgM血清或来自组织液(如唾液、粘膜)的其他适当合格的样本,或小鼠细胞培养物。仅供研究使用(RUO),不用于诊断、治疗或预防疾病。

 

小鼠IgM ELISA试剂盒检测原理:

小鼠IgM ELISA试剂盒基于样品中的小鼠IgM与两种抗体的结合,一种固定在微孔板井中,另一种与辣根过氧化物酶(HRP)酶偶联。经过洗涤步骤后,加入显色底物,并通过HRP在TMB底物上的酶促反应产生颜色,该颜色与样品中IgM的含量成正比。加入终止液以终止反应,然后使用ELISA微孔板读数器测量450nm处的吸光度。样品和对照中的IgM浓度是根据含有已知浓度IgM的标准曲线计算得出的。

 

艾美捷小鼠IgM ELISA试剂盒

货号:ADI-6380

特异性:本试剂盒中使用的抗体已经通过免疫电泳和ELISA显示,它们能特异性地与IgM反应,基本上不与IgG、IgA、IgE或其他任何小鼠血清蛋白发生反应。

以下物种的血清在1:400稀释下显示无显著反应:人类、大鼠、仓鼠、豚鼠、牛、猪、马、羊、山羊、狗、猫、兔子或鸡;同样还有10%的新生牛血清。

正常范围:对20只瑞士小鼠储存的血清进行IgM检测,范围从22到712微克/毫升(中位数=519微克/毫升)。每个实验室应确定其自身测试人群的预期值。

精确度:含有低、中、高浓度IgM的样本,代表3种不同的血清,在相同检测中多次检测(n=10)以提供内部检测精确度,并作为多个检测中的重复样本(n=5)以获得检测间重复性。使用点对点曲线拟合程序计算浓度的变异系数。

IgM浓度的内部检测(3.9到6.7% CV)和检测间(5.2到8.5% CV)重复性非常好。

储存和稳定性:如果未开封,微孔板和其他所有试剂在2-8摄氏度下稳定,直至标签上打印的有效期。工作溶液的稳定性在试剂准备部分指明。

 

结果计算:

1. 结果可以使用任何免疫分析软件包进行计算。推荐使用四参数曲线拟合。如果没有软件可用,IgM浓度可以按照以下方式确定:

2. 计算重复样本的平均OD值。

3. 在坐标纸上,将标准品的平均OD值(y轴)与IgM的浓度(ng/ml)(x轴)绘制出来。通过这些点绘制最佳拟合曲线,构建标准曲线。点对点构建是最常见和可靠的方法。

4. 通过插值从标准曲线确定未知样本和对照物中的IgM浓度。

5. 将样本获得的值乘以每个样本的稀释因子。

6. 产生信号高于200 ng/ml标准品的样本应进一步稀释并重新检测。

 

小鼠IgM ELISA试剂盒典型结果:

以下数据仅供说明之用。每次检测都应运行完整的标准曲线以确定样本值。

小鼠IgM ELISA试剂盒

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