小鼠抗Sm总Ig ELISA试剂盒是一种穆诺斯塞适用于定量或滴定总抗体活性(IgG、IgA血清或血浆中Sm(Smith)抗原特异性抗体(IgM)。其他生物流体,包括组织培养基,可以是验证使用。
小鼠抗Sm IG(总(A+G+M))ELISA试剂盒检测原理:
小鼠抗Sm总Ig ELISA试剂盒基于样品中小鼠抗Sm IgG、IgA和IgM与固定在微孔板上的Sm的结合,总抗Sm抗体通过与辣根过氧化物酶(HRP)酶偶联的特异性抗小鼠IgG+IgA+IgM(H+L)抗体来检测。经过洗涤步骤后,加入显色底物(TMB),并通过HRP在底物上的酶促反应产生颜色,该颜色与样品中存在的抗Sm Ig的量成正比。加入终止液以终止反应,然后使用ELISA微孔板读数器测量450nm处的吸光度。样品中总小鼠抗体的活性是相对于小鼠抗Sm校准物计算的。
艾美捷小鼠抗Sm IG(总(A+G+M))ELISA试剂盒:
货号:ADI-5405
特异性:使用纯化的SMA(Smith抗原)涂层微孔板;因此,该检测专门针对针对SMA的抗体。抗小鼠IgG+IgA+IgM (H+L) HRP偶联物与结合到板上Sm的小鼠IgG、IgA和IgM类抗体反应。IgE抗体不会在背景信号之上被测量。
检测灵敏度:SMA涂层水平、HRP偶联物浓度和低非特异性结合样本稀释液被优化,以区分小鼠血清样本稀释1:100后抗Sm Ig与背景(非抗体)信号。
校准物值:校准物是对SMA有反应的小鼠抗体稀释液。值被赋予为任意的抗Sm活性单位(见检测的限制)。
试剂盒内容:如果未开封,微孔板和其他所有试剂在2-8摄氏度下稳定,直至盒标签上打印的有效期。工作溶液的稳定性在试剂准备部分指明。
结果计算:
方法. 样品稀释曲线的滴度
从每个样品的稀释曲线计算抗体活性的滴度被推荐为最准确的定量方法。使用以下指南可以获得最佳的精确度:
1. 使用处于检测中段范围的OD值指数(2.0 – 0.5 OD);这为比较实验组和重复实验提供了最佳的灵敏度和可重复性。常用的任意1.0 OD值。
2. 准备每个样品的连续稀释,以产生高于和低于所选指数的信号。如果稀释准确,每个样品运行至少4个稀释级时,可能不需要重复实验。
3. 5倍稀释方案有助于有效覆盖产生高于和低于1.0 OD的广泛范围。稀释方案可以收紧到3倍或2倍,以获得更精确的比较数据。
4. 可以使用处于中OD范围的校准值(例如,200 U/ml)来标准化不同检测间的值。
小鼠抗Sm IG(总(A+G+M))ELISA试剂盒文献参考:
1. On a log scale of inverse of Sample Dilution as the x-axis,plot the OD values of the two dilutions of each positive sample having ODs above and below the OD value of the Index (arbitrary or selected Calibrator).
2. From a point-to-point line drawn between the two sample ODs, read the dilution value (x-axis) corresponding to the OD of the selected Index
示例:
II. 使用1.0 OD指数来确定4种抗体的滴度。
滴度值
样品A=1.72 kU
样品B=5.70kU
样品C=1.85 kU
样品D=7.90kU
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