小鼠抗ssDNA总Ig ELISA试剂盒是一种免疫测定试剂盒适用于定量或滴定总抗体活性(IgG、IgA以及IgM),其对血清或血浆中的ssDNA具有特异性。其他生物可以验证包括组织培养基在内的流体的使用。
小鼠抗ssDNA IG(总(A+G+M))ELISA试剂盒检测原理:
鼠抗单链DNA总Ig ELISA试剂盒基于小鼠抗单链DNA IgG、IgA和IgM与微孔板上固定的单链DNA的结合,通过抗小鼠IgG+IgA+IgM-HRP偶联物检测总抗单链DNA抗体。经过洗涤步骤后,加入显色底物(TMB)并产生颜色(蓝色),该颜色与样本中存在的抗单链DNA Ig的量成正比。加入终止液以终止反应(将蓝色转为黄色),然后使用ELISA读数器测量A450nm。样本中总小鼠抗体的活性是相对于校准物计算的。
艾美捷小鼠抗ssDNA IG(总(A+G+M))ELISA试剂盒:
货号:ADI-5310
特异性:使用纯化的单链DNA涂层微孔板;因此,该检测专门针对针对单链DNA的抗体。抗小鼠IgG+IgA+IgM (H+L) HRP偶联物与结合到板上单链DNA的小鼠IgG、IgA和IgM类抗体反应。IgE抗体不会在背景信号之上被测量。
检测灵敏度:单链DNA涂层水平、HRP偶联物浓度和低非特异性结合样本稀释液被优化,以区分小鼠血清样本稀释1:100后抗单链DNA Ig与背景(非抗体)信号。
试剂盒内容:如果未开封,微孔板和其他所有试剂在2-8摄氏度下稳定,直至盒标签上打印的有效期。工作溶液的稳定性在试剂准备部分指明。
结果计算:
方法:样品稀释曲线的滴度
建议从每个样品的稀释曲线计算抗体活性的滴度作为最准确的定量方法。使用以下指南可以获得最佳的精确度:
1. 使用处于检测中段范围的OD值指数(2.0 – 0.5 OD);这为比较实验组和重复实验提供了最佳的灵敏度和可重复性。常用的任意1.0 OD值。
2. 准备每个样品的连续稀释,以产生高于和低于所选指数的信号。如果稀释准确,每个样品运行至少4个稀释级时,可能不需要重复实验。
3. 5倍稀释方案有助于有效覆盖产生高于和低于1.0 OD的广泛范围。稀释方案可以收紧到3倍或2倍,以获得更精确的比较数据。
4. 可以使用处于中OD范围的校准值(例如,200 U/ml)来标准化不同检测间的值。
计算方法:
1. 在以样品稀释倒数的对数尺度为x轴的图表上,绘制每个阳性样品的两个稀释级的OD值,这些样品的OD值高于和低于所选指数的OD值(任意或选定的校准器)。
2. 从两点之间绘制的直线上,读取与所选指数的OD值相对应的稀释值(x轴)= 总Ig抗体活性单位
示例:
使用1.0 OD指数来确定4种抗体的滴度。
滴度值
样品A = 1.72 kU
样品B = 5.70 kU
样品C = 1.85 kU
样品D = 7.90 kU
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