Alpha Diagnostic International/艾美捷小鼠抗dsDNA IgG特异性ELISA试剂盒检测设计方案

Alpha Diagnostic International小鼠抗dsDNA IgG特异性ELISA定量试剂盒，96次检测，是一种适用于定量或微量滴定孔板和所有其他试剂（如果未打开）稳定在2-8oC，直至包装箱标签上打印的保质期。试剂下标明了工作溶液的稳定性准备。

艾美捷Alpha Diagnostic International 小鼠抗dsDNA IgG特异性ELISA试剂盒，96次检测，定量：

货号：ADI-5120

可用性：现货

抗原：dsDNA抗体

形式：标准品浓度为50-1000 U/ml；样本：100 ?L（1:100）；定量；基于抗原的抗体测定，提供96次测试

试剂盒内容：标准品浓度为50-1000 U/ml，dsDNA固定在微孔板上

安全数据表（MSDS）：TMB（底物）、H?SO?（1%在缓冲终止溶液中）、Prolcin-300（在标准品、样本稀释液和HRP结合物中的体积比为0.1%）

产品类型：ELISA试剂盒

样本：血清、血浆、培养基和其他液体均可适用

物种反应性：小鼠

Alpha Diagnostic International小鼠抗dsDNA IgG特异性ELISA试剂盒，96次检测样本采集与处理

培养基、血清及其他生物液体可作为样本使用，需适当稀释以避免溶液基质干扰。对于血清，采用静脉穿刺采集血液，允许其凝固后，通过室温离心分离血清。对于其他样本，包括细胞培养基，在稀释到样本稀释液之前，需通过离心和/或过滤对样本进行澄清。

抗体稳定性

建议将血清初步稀释到工作样本稀释液（WSD）中，以稳定抗体活性。这可以提高可重复的采样，并在冷藏或冷冻保存的情况下，使抗体活性保持数年。进一步稀释到低非特异性结合样本稀释液（LNSD）中，以提供最低的检测背景，稀释倍数应至少为初始稀释的10倍，并且应在检测当天进行。

检测设计

在继续之前，请查看结果计算和检测限制：

选择适当的样本稀释。考虑阳性样本的预期效力，尽量减少非特异性结合（NSB）和其他基质效应；例如，非免疫样本的净信号应<0.5 OD。对于IgG和IgM水平正常的小鼠血清，通常需要稀释到1/100或更大。在工作样本稀释液（1xSD20T）或低NSB样本稀释液（TBTm）中稀释样本（见上文）。注意：所有样本必须在相同的稀释液中稀释，以便进行适当比较——要么是TBTm，要么是1xSD20T。

运行样本稀释液空白对照。该信号是检测性能良好的指示，特别是洗涤效果，并可用于净OD计算（如有需要）。空白OD应<0.3。参见方法A和B。

运行一组标准品。标准品验证检测是否按照规格进行，并可用于在检测间进行标准化，以提高精确度。从标准品曲线读取值的方法C有其局限性。见上文的检测限制。

运行一系列样本稀释，以便对于预期更高阳性样本计算抗体滴度（当特定滴度至少高于非免疫样本4倍时）。

如果用于定量，则重复运行样本；与免疫样本相比显著低的非免疫样本可以单次运行。用于定量的标准品（例如，用于检测间标准化）应以重复方式运行。当根据稀释曲线确定滴度时，如果使用了两个以上的稀释点，可以单次运行。

结果计算：

使用校准曲线，当样本的稀释曲线与校准曲线平行时（见检测限），可以通过插值法从校准曲线中确定抗双链DNA（anti-dsDNA）活性单位。结果可以使用任何免疫测定软件包进行计算。如果没有可用的软件，可以按以下步骤确定抗-dsDNA活性浓度：

1.计算重复样本的平均光密度（OD）。

2.在图纸上绘制校准物的平均OD（纵轴）与抗-dsDNA浓度（U/ml，横轴）的关系图。通过这些点绘制最佳拟合曲线

3.以构建校准曲线。逐点构建是极为常见和可靠的方法。

4.可以通过插值法从校准曲线中确定未知样本和对照品中的抗-dsDNA活性浓度。

5.将样本获得的值乘以每个样本的稀释因子。

6.产生高于1000 U/ml校准物信号的样本应进一步稀释并重新测定。

Alpha Diagnostic International（ADI）致力于开发、制造和供应新型诊断和质量控制试剂及检测试剂盒，用于人类和动物的基础生物学和疾病研究。艾美捷科技是Alpha Diagnostic International 的特约合作代理商，为科研工作者提供优质的产品与服务。