小鼠抗dsDNA总Ig ELISA试剂盒是一种免疫测定试剂盒适用于定量或滴定总抗体活性(IgG、IgA以及IgM),其对血清或血浆中的双链DNA具有特异性。其他生物流体,包括组织培养基,可以是验证使用。
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小鼠抗 dsDNA Ig's(总 A+G+M)ELISA 试剂盒,96 次检测,定量 | ADI-5110 | 查看 |
小鼠抗 dsDNA Ig's(总 A+G+M)ELISA 试剂盒,96 次检测,定量检测原理:
小鼠抗双链DNA总Ig ELISA试剂盒基于样品中小鼠抗双链DNA IgG、IgA和IgM与固定在微孔板上的双链DNA的结合,并通过与辣根过氧化物酶(HRP)酶偶联的抗小鼠IgG+IgA+IgM(重链+轻链)特异性抗体来检测总抗双链DNA抗体。经过洗涤步骤后,添加显色底物(TMB),并通过HRP在底物上的酶促反应产生颜色,该颜色直接与样品中抗双链DNA Ig的含量成正比。添加终止液以终止反应,然后使用ELISA微孔板读取器测量450nm处的吸光度。样品中总小鼠抗体的活性是相对于抗双链DNA校准物计算得出的。
特异性:
使用纯化的双链DNA(dsDNA)涂层微孔板,因此该检测特异性针对针对dsDNA的抗体。抗小鼠IgG+IgA+IgM(H+L)HRP偶联物与结合到板上dsDNA的小鼠IgG、IgA和IgM类抗体反应。IgE抗体不会在背景信号之上被测量。
检测灵敏度:
dsDNA涂层水平、HRP偶联物浓度和低非特异性结合(NSB)样品稀释液(Low NSB Sample Diluent)均已优化,以区分小鼠血清样品稀释1:100后的抗dsDNA Ig与背景(非抗体)信号。
试剂盒内容:
如果未开封,微孔板和其他所有试剂在2-8摄氏度下稳定,直至盒标签上打印的有效期。
工作溶液的稳定性在试剂准备下指示。
检测设计和设置:
低NSB样品稀释液(Low NSB Sample Diluent, TBTm)比1xSD20T稀释液更能降低NSB,而不会减少真正的阳性抗体信号,从而提供更大的阳性与非免疫样品之间的区分度。
样品收集和处理:
培养基、血清和其他生物液体可以作为样品使用,适当稀释以避免溶液基质干扰。对于血清,通过静脉采血,允许凝血,并通过室温离心分离血清。对于其他样品,包括组织培养基,在用样品稀释液稀释之前,通过离心和/或过滤澄清样品。
抗体稳定性:
建议将血清初步稀释到工作样品稀释液(WSD)中以稳定抗体活性。这增强了可重复的采样,并在冷藏或冷冻保存时稳定抗体活性多年。进一步稀释到提供最低检测背景的低NSB样品稀释液(LNSD)中,应至少是初步稀释的10倍,并在检测当天进行。
示例:初步(1/5):10ul血清 + 40ul WSD [或0.1ml + 0.4ml]
进一步(1/50):10ul初步(1/5)+ 90ul LNSD(1/50)
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