Alpha Diagnostic International小鼠抗dsDNA-Ig(总A+G+M)ELISA试剂盒,定量,96次检测,是一种免疫测定试剂盒适用于定量或滴定总抗体活性(IgG、IgA以及IgM),其对血清或血浆中的双链DNA具有特异性。其他生物流体,包括组织培养基,可以是已验证使用。
艾美捷Alpha Diagnostic International 小鼠抗双链DNA Ig(总A+G+M)ELISA试剂盒,定量,96次检测:
货号:ADI-5110
规格:
标准品:0-6550 ng/ml; 样本:100 ?L(1:100稀释); 灵敏度:400 ng/ml; 检测时间:75分钟; 定量检测,标准品:0-5000 ng/ml; 样本:100 ?L(1:100稀释); 灵敏度:75 ng/ml; 检测时间:75分钟,96次检测。
安全数据表(MSDS):TMB(底物)、H?SO?(在缓冲终止溶液中1%)和Prolcin-300(在标准品、样本稀释液和HRP标记物中0.1% v/v)。
产品类型:ELISA试剂盒。
样本:血清、血浆、培养基和其他液体可适应使用。
交叉反应性:该试剂盒测量小鼠血清中的抗双链DNA免疫球蛋白(IgG+A+M)。也可提供抗双链DNA(IgG或IgM特异性)试剂盒。
物种反应性:小鼠。
Alpha Diagnostic International小鼠抗dsDNA-Ig(总A+G+M)ELISA试剂盒内容:
纯化的双链DNA涂层条形板(8孔 x 12条)。
小鼠抗双链DNA免疫球蛋白标准品A(0 ng/ml),0.65 mL。
小鼠抗双链DNA免疫球蛋白标准品B(0.812 ?g/ml),0.65 mL。
小鼠抗双链DNA免疫球蛋白标准品C(1.62 ?g/ml),0.65 mL。
小鼠抗双链DNA免疫球蛋白标准品D(3.25 ?g/ml),0.65 mL。
小鼠抗双链DNA免疫球蛋白标准品E(6.5 ?g/ml),0.65 mL。
山羊抗小鼠IgG HRP标记物(H+L),0.120 mL(100X)。
样本稀释液(10X),10 mL。
洗涤溶液(100X),10 mL。
TMB底物,12 mL。
终止溶液,12 mL。
完整说明手册。
Alpha Diagnostic International小鼠抗双链DNA Ig(总A+G+M)ELISA试剂盒,定量,96次检测检测原理:
小鼠抗双链DNA(dsDNA)总免疫球蛋白ELISA试剂盒基于样本中小鼠抗双链DNA IgG、IgA和IgM与固定在微孔板上的双链DNA结合的原理。通过与HRP(辣根过氧化物酶)酶偶联的抗小鼠IgG+IgA+IgM(重链+轻链)特异性抗体检测总抗双链DNA抗体。
经过洗涤步骤后,添加显色底物(TMB),并通过HRP在底物上的酶促反应产生颜色,该颜色与样本中存在的抗双链DNA Ig的量成正比。添加终止溶液以终止反应,然后使用ELISA微孔板读数仪测量450 nm处的吸光度。样本中总小鼠抗体的活性相对于抗双链DNA标准品进行计算。
结果计算:
方法:样本稀释曲线的抗体效价
从每个样本的稀释曲线计算出的抗体活性效价被推荐为最准确的定量方法。可以使用以下指导方针获得最佳的精确度:
在检测的中间范围内使用光密度(OD)值指数(2.0 – 0.5 OD);这为比较实验组和重复样本提供最佳的灵敏度和重复性。通常使用一个任意的1.0 OD值。
准备每个样本的系列稀释,提供一系列信号,使其高于和低于所选指数。通过准确稀释,如果每个样本至少运行4个稀释样本,可能不需要重复样本。
5倍稀释方案有助于有效覆盖广泛的范围,从而产生高于和低于1.0 OD的OD值。稀释方案可以收紧至3倍或2倍,以获得更精确的比较数据。
在中间OD范围(例如,200 U/ml)使用校准值,可以用来标准化各次检测之间的数值。
计算方法:
在以样本稀释的倒数为x轴的对数坐标上,绘制每个阳性样本的两个稀释的OD值,分别为高于和低于所选指数的OD值(任意或选定的校准值)。
从连接两个样本OD的点对点线中,读取与所选指数的OD值相对应的稀释值(x轴)
= 总Ig抗体活性单位
典型结果:
孔位 标准品 A450 nm
A1,2 阴性稀释液空白 0.12
B1,2 50 U/ml标准品 0.48
C1,2 200 U/ml标准品 1.20
D1,2 500 U/ml标准品 2.01
E1,2 1000 U/ml标准品 2.47
F1,2 样本 1:100 1.06
样本结果:154 U/ml × 100倍稀释 = 15.4 kU/ml
Alpha Diagnostic International(ADI)致力于开发、制造和供应新型诊断和质量控制试剂及检测试剂盒,用于人类和动物的基础生物学和疾病研究。艾美捷科技是Alpha Diagnostic International 的特约合作代理商,为科研工作者提供优质的产品与服务。
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