HyStem巯基改性透明质酸基于交联巯基修饰透明质酸技术。透明质酸是存在于结缔组织、上皮组织和神经组织的胞外基质中的天然成分。通过HyStem?,研究人员可以创建可定制的3D水凝胶,用于培养细胞,其自然环境富含透明质酸。HyStem?水凝胶套装包括:- Glycosil?(巯基修饰透明质酸)- Extralink?-Lite(PEGDA,聚乙二醇丙烯酸二丙烯酯)- 重组缓冲液(PBS)HyStem?套装组分混合后形成透明水凝胶。除了重组缓冲液外,其余组分均以冻干固体包装,被氮气包裹并在轻微真空下长期储存。
艾美捷HyStem巯基改性透明质酸(ABM-GS310F)细胞附着:
HyStem?水凝胶系统提供了一种可变刚度的粘弹性基质,支持干细胞的扩张(迄今已测试了人类胚胎干细胞、CD34+和肝细胞前体细胞)。HyStem?水凝胶不支持表面细胞附着。细胞必须被封装在水凝胶内。细胞外基质(ECM)蛋白或肽可以与Glycosil在交联之前混合,以提供附着信号,并允许细胞附着在水凝胶表面。然而,添加的ECM蛋白类型取决于细胞类型和期望的结果(扩张而无分化或伴随分化)。Hystem?-C和Hystem?-HP套装支持细胞附着,可在AdvancedBioMatrix.com上找到。
储存Glycosil:储存在-20°C,可保存一年。重组溶液必须在同一天使用,不能重新冷冻。Extralink-Lite:储存在-20°C,可保存一年。重组溶液可在-20°C保存一个月。重组缓冲液:储存在4°C或室温,可保存一年。
HyStem巯基改性透明质酸使用说明:
Glycosil和Extralink-Lite溶液通过用重组缓冲液溶解冻干固体来准备。重组后,Glycosil和Extralink-Lite将在pH约为7.4的1X磷酸盐缓冲液(PBS)中。按照说明重组后,套装将能够产生2.5、7.5或12.5毫升的材料以形成3D水凝胶。1)让套装组分室温恢复1小时。2)使用注射器和针头用重组缓冲液重组套装组分。如果在重组过程中移除瓶塞,请尽量减少暴露在氧气中,以避免潜在的自交联。3)在加入重组缓冲液后,立即将每个小瓶涡旋几秒钟。将小瓶水平放置在摇床或摇床上。每隔15分钟快速涡旋样品。有些组分可能需要>2小时才能完全溶解。加热至37°C并轻轻涡旋将加速溶解。组分将变清澈且略带黏稠。4)将Extralink-Lite以1:4的体积比例加入到Glycosil中形成3D水凝胶。1. - 对于2.5毫升和7.5毫升套装:0.25毫升Extralink-Lite到1.0毫升Glycosil,对于2.5毫升和7.5毫升套装- 对于12.5毫升套装:2.5毫升Extralink-Lite到10.0毫升Glycosil2. 用移液器混合。3. 如果封装细胞,请在加入Extralink-Lite之前将细胞沉淀重悬于Glycosil溶液中。来回移液以混合。4. 将所有组分混合后,等待5分钟,然后再次用移液器混合以确保细胞均匀分布。5)将HyStem注入所需的培养皿。凝胶化将在约15分钟内开始,完全凝胶化将在约90分钟内发生。
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