细胞培养用HyStem透明质酸3D水凝胶套装使用说明

HyStem 硫醇修饰透明质酸 12.5 mL 套件基于交联巯基修饰透明质酸技术。透明质酸是自然存在于结缔组织、上皮组织和神经组织细胞外基质中的成分。通过HyStem?，研究人员可以创建可定制的3D水凝胶，用于培养在其天然环境中富含透明质酸的细胞。

艾美捷细胞培养用HyStem透明质酸3D水凝胶套装（ABM-GS1004F）包括：

- Glycosil?（巯基修饰透明质酸）

- Extralink?-Lite（PEGDA，聚乙二醇双丙烯酸酯）

- 重组缓冲液（PBS）Hystem?套装组分混合后形成透明水凝胶。

细胞附着HyStem?水凝胶系统提供具有可变刚度的粘弹性基质，支持干细胞的扩增（迄今已对人类胚胎干细胞、CD34+细胞和肝细胞祖细胞进行了测试）。HyStem?水凝胶不支持表面细胞附着。细胞必须被封装在水凝胶中。细胞外基质（ECM）蛋白或肽可以在交联前与Glycosil混合，以提供附着信号并允许细胞附着在水凝胶表面。然而，添加的ECM蛋白类型取决于细胞类型和所需结果（扩增而无分化或伴有分化）。

存储说明：

Glycosil：在-20°C条件下储存，可保存一年。重组后的溶液必须在同一天使用，不能重新冷冻。

Extralink-Lite：在-20°C条件下储存，可保存一年。重组后的溶液可在-20°C条件下保存一个月。

重组缓冲液：在4°C或室温条件下储存，可保存一年。

HyStem透明质酸3D水凝胶套装使用说明：

Glycosil和Extralink-Lite溶液通过用重组缓冲液溶解冻干固体来制备。重组后，Glycosil和Extralink-Lite将在pH约为7.4的1X磷酸缓冲盐溶液（PBS）中。按照说明重组后，套装将能够产生2.5、7.5或12.5毫升的材料以形成3D水凝胶。

1）让套装组分回到室温，静置1小时。

2）使用注射器和针头，用重组缓冲液重组套装组分。如果在重组过程中取下瓶塞，请尽量减少暴露在氧气中，以避免潜在的自交联。请按照下面的重组图表操作。

3) 在加入重组缓冲液后，立即对每个瓶进行几秒钟的涡旋。将瓶水平放在摇床或摇床上。每隔15分钟快速涡旋样品。有些组分可能需要超过2小时才能完全溶解。加热至37°C并轻轻涡旋将加速溶解。组分将变清晰并略带黏稠。

4) 当以1:4体积比向Glycosil中加入Extralink-Lite时，将形成3D水凝胶。1. - 对于2.5毫升和7.5毫升套装：0.25毫升Extralink-Lite对应1.0毫升Glycosil，用于2.5毫升和7.5毫升套装- 对于12.5毫升套装：2.5毫升Extralink-Lite对应10.0毫升Glycosil2. 用移液管混合。3. 如果要封装细胞，在加入Extralink-Lite之前将细胞沉淀重悬于Glycosil溶液中。来回移液管混合。4. 将所有组分混合后，等待5分钟，然后再次用移液管混合以确保细胞均匀分布。

5) 将HyStem分装到所需的孔板中。凝胶化将在约15分钟内开始，并在约90分钟内完全凝胶化。