Advanced BioMatrix Apricell 3 合 1 板，6 孔板，带 6 个水凝胶插入物，用于球状体和类器官培养

Apricell 3 合 1 板是一种水凝胶插入物，可安装在六孔板的每个孔中。该插入物将球体/类器官形成、细胞外基质整合和药物测试全部结合在一个平台上。水凝胶预先插入标准六孔板的每个孔中。每个插入物包含 4 个象限，允许每个象限形成 6 个球体/类器官。六孔板可用于 144 个球体/类器官。每个象限彼此分开，因此研究人员可以在一个插入件上运行 4 种不同的实验条件。该水凝胶是一种非细胞粘附性水凝胶。该板具有无干扰介质更换的优点，消除了更换介质时吸入或破坏球体的风险。此外，该板还可以进行原位 IHC 分析。研究人员可以执行 IHC 分析的所有步骤——从脱水到蜡包埋和切片——而无需从平台上取出球体。

艾美捷科技强烈推荐Advanced BioMatrix热销产品Apricell 3 合 1 板，6 孔板，带 6 个水凝胶插入物，用于球状体和类器官培养。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

接种方案：

1- 细胞接种和球体形成*根据您期望的球体大小和微孔直径，每个象限中接种的细胞数量可以在50K到350K细胞之间变化。可能需要优化接种细胞数量。每次接种可以产生六个球体或器官样体。该方案经过优化，适用于癌细胞球体*

1-1- 在层流罩内使用无菌技术，打开密封袋，在插入物的每个隔间的细胞/ECM加载区（图1）中加入25微升培养基。

1-2- 2分钟后，在每个插入物的细胞/ECM加载区中加入50微升细胞悬液1，并在细胞培养条件下孵育10分钟，让细胞沉淀到微孔中。确保将细胞悬液靠近凝胶滴入，以避免气泡困住。该过程如图2所示。

1-2-1- 可选的直接共培养：微环境中存在的任何类型的次级细胞可以与主细胞一起悬浮准备，并可以接种到每个隔间的细胞/ECM加载区中。

1-3- 当细胞沉降到微孔中后，通过向细胞/ECM加载区中加入70-100微升预热培养基轻轻冲洗任何卡在通道中的额外细胞。然后，通过将吸头尽可能靠近微孔，将介质吸出。从次级储液槽中移除任何额外介质（见图1）。如果观察到细胞/ECM加载区通道中仍有任何残留的单个细胞，请重复冲洗步骤。

1-4- 最后，在培养基槽中和每个象限的细胞/ECM加载区中加入80微升预热新鲜培养基。在细胞培养条件下孵育。

1-5- 每天监测球体形成和生长，并定期更换培养基，直到球体达到您期望的大小。

细胞外基质应用

2-1- 在插入物的每个象限的微孔中形成球体后，轻轻吸出培养基槽中的介质5，然后向细胞/ECM加载区6中加入40-60微升所需的水凝胶溶液。

2-1-1- 可选共培养：微环境中存在的任何类型的正常（基质）细胞可以以一定浓度悬浮并与ECM水凝胶溶液混合，然后再应用到球体上7。

2-1-2- 次级ECM应用：如有必要，可以通过将其加入次级储液槽（储液体积：20微升）作为主要ECM的覆盖层来添加次级ECM。在应用次级ECM之前，请确保吸出所有介质。

2-1-3- 免疫细胞共培养：免疫细胞可以与一定浓度的次级ECM混合，并加入次级储液槽8。

2-2- 在添加ECM但在固化之前9，将培养皿放置在层流罩下2-5分钟（休息时间）10，让水凝胶溶液填满每个隔间的微通道和微孔。

2-3- 在交联水凝胶后，轻轻向培养基槽中加入80微升预热新鲜培养基，并向插入物的每个隔间的细胞/ECM加载区中加入80微升。在细胞培养条件下孵育。

2-4- 每天监测球体并定期更换培养基4，直到球体达到您期望的大小。

2-5- 对于药物测试，只需将化合物与培养基混合至所需浓度，然后加入培养基槽。

美国Advanced BioMatrix是3D组织培养、细胞检测和细胞增殖等领域实验解决方案的佼佼者，在分离、纯化、冻干、细胞培养和蛋白检测、多肽粘附、附着因子、基质硬度和其他3D matrix 产品开发方面有着丰富的经验。

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