三维(3D)凝胶允许研究细胞外基质(ECM)的力学特性,如密度和刚度,对细胞发育、迁移和形态的影响。与二维系统不同,3D环境允许细胞延伸与所有细胞表面上的整合素同时相互作用,导致特定信号通路的激活。凝胶的硬度或刚度也会在3D与2D环境中对细胞迁移产生不同影响。此外,在3D系统中可能存在由于基质纤维与细胞延伸缠绕而产生的整合素独立的机械相互作用,但在细胞附着于平坦表面的2D系统中则不存在。Advanced BioMatrix提供PhotoGel?,一种纯化的明胶甲基丙烯酸套件,可提供类似天然的3D明胶凝胶,具有独特属性,可以在不同浓度下制备,并进行UV交联以提供不同的凝胶硬度。尽管它是变性的胶原蛋白,但明胶保留了许多天然结合基序,如RGD和MMP位点。PhotoGel? UV套件包括明胶甲基丙烯酸和UV活化的光引发剂。
艾美捷科技强烈推荐Advanced BioMatrix热销产品PhotoGel 50% DS 甲基丙烯酸酯明胶,2 x 500 mg,带钌试剂盒。产品仅用于科研,不可用于临床诊断。
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PhotoGel 50% DS 甲基丙烯酸酯明胶,2 x 500 mg,带钌试剂盒 | ABM-5400-1KIT | 查看 |
存储/稳定性:产品在冷冻凝胶包装中发货。收到后,请将明胶甲基丙烯酸存放在-20°C。将Irgacure存放在2至10°C。
制备说明注意:采用无菌操作以保持产品在制备和处理胶原蛋白和其他溶液过程中的无菌性。
注意:以下说明适用于10%明胶甲基丙烯酸溶液。推荐浓度为5-20%
1. 将10毫升无菌温暖的1X PBS或1X细胞培养基加热至>60°C。
2. 将5毫升加热后的溶液加入含有500毫克冻干明胶甲基丙烯酸的琥珀色瓶中。
3. 在摇床或旋转板上混合,直至完全溶解。如可能保持温暖(>37°C),有助于完全溶解(例如将旋转器放入培养箱中)。
4. 将1毫升纯甲醇加入含有100毫克Irgacure的小琥珀色瓶中,并振荡。(注意 – Irgacure在溶液中的保质期为2周。只需将所需量的Irgacure粉末溶解在10%溶液中)
5. 通过将所需的明胶总体积乘以0.01来计算所需的光引发剂的体积。(如果要直接加入5毫升中,则需加入0.05毫升的irgacure)
6. 将计算出的光引发剂体积加入所需的明胶溶液中,并彻底混合。
7. 将您的细胞加入明胶/光引发剂溶液中。
8. 将您的明胶/光引发剂/细胞溶液分配到所需的培养皿中(例如6孔板,48孔板)。
9. 对于UV交联,直接将印刷结构放置在365纳米紫外光交联源下。较长的曝光时间可以实现更多的交联,尽管每种细胞类型对紫外光和光引发剂产生的自由基(介导交联的物质)具有不同的耐受程度。任何多余材料均可冷藏保存。材料会凝胶。将其加热至>30°C,使其再次变为液体。。
美国Advanced BioMatrix是3D组织培养、细胞检测和细胞增殖等领域实验解决方案的佼佼者,在分离、纯化、冻干、细胞培养和蛋白检测、多肽粘附、附着因子、基质硬度和其他3D matrix 产品开发方面有着丰富的经验。
产品竞争优势:
. 提供高纯度和成分确定的胞外基质;
. 超过1000余篇文献引用PureCol 胶原产品,品质非常均一;
. 在3D培养基领域可提供全面的产品线;
. 可提供特异性刚性有机硅基板的公司(CytoSoft);
. 可提供可溶性丝纤蛋白的供应商(可运用于多种3D培养);
. 如果客户首次接触3D胶原凝胶,Advanced BioMatrix是预制胶原蛋白(PureCol EZ gel)供应商。
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