Advanced BioMatrix 胶原蛋白杂交肽，CY3 结合物（红色）的应用和特点

三螺旋是胶原蛋白的标志性蛋白质结构。在组织重塑过程中，三螺旋胶原蛋白分子被特定蛋白酶（例如 MMP 或组织蛋白酶 K）降解，并在体温下展开。胶原蛋白杂交肽 (CHP) 是一种合成肽，无论在组织学、体内还是体外（3D 细胞培养物）中，都可以通过氢键与此类变性胶原蛋白链特异性结合。通过共享天然胶原蛋白的结构基序和 Gly-XY 重复序列，CHP 具有与变性胶原蛋白链杂交的强大能力，其方式类似于 PCR 过程中 DNA 片段与其互补 DNA 链退火。 CHP是一种针对未折叠胶原蛋白分子的极其特异性的探针：由于缺乏结合位点，它对完整胶原蛋白分子的亲和力可以忽略不计；由于其中性和亲水性，它对非特异性结合也呈惰性。

艾美捷科技强烈推荐Advanced BioMatrix热销产品胶原蛋白杂交肽，CY3 结合物（红色）。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

胶原蛋白杂交肽，CY3 结合物（红色）概念验证结果：

A. 用F-CHP（15微米，过夜4°C孵育）染色的猪韧带冰冻切片的荧光显微图。右侧面板显示的样本经过热水处理，有意使胶原变性。可以在变性样本中检测到与胶原结合的F-CHP的显著荧光信号，而在完整切片中看不到信号，表明CHP对变性胶原链具有高特异性。两个样本在相同条件下染色和成像。比例尺：200微米。

B. 冷冻猪韧带切片显示了完整（中间）和热变性组织样本（左侧）之间R-CHP结合的显著差异。与预热的单体R-CHP（左侧）相比，未经预热步骤使用的三螺旋R-CHP（右侧）结合显著减少。比例尺：1000微米。蓝色：DAPI染色的细胞核。

C. 经过热介导的抗原检索后，用B-CHP通过免疫组织化学在福尔马林固定（FFPE）的猪韧带切片中非荧光地可视化完整的胶原含量，进一步通过NeutrAvidin的辣根过氧化物酶（HRP）共轭检测。比例尺：200微米。

D. CHP可以在SDS-PAGE凝胶（凝胶内Western印迹）中特异性地检测胶原条带。在洗去SDS后，含有胶原I（1微克）和3T3成纤维细胞裂解物的SDS-PAGE凝胶被F-CHP染色（左侧，由荧光凝胶成像仪成像，λex = 488 nm）。同一凝胶随后被考马斯亮蓝染色并拍照（右侧）。左侧图像中裂解物和分子标记条带的缺失显示了CHP对胶原链结合的显著特异性。

文献参考：

[1] Targeting and mimicking collagens via triple helical peptideassemblies. Current Opinion in Chemical Biology, 2013, 17,968–975.

[2] In situ imaging of tissue remodeling with collagen hybridizingpeptides. ACS Nano, 2017, 11, 9825–9835.

[3] Targeting collagen strands by photo-triggered triple-helixhybridization. Proceedings of the National Academy ofSciences of the United States of America, 2012, 109, 14767–14772.

[4] Visualizing collagen proteolysis by peptide hybridization:From 3D cell culture to in vivo imaging. Biomaterials, 2018,183, 67–76.

[5] Direct detection of collagenous proteins by fluorescentlylabeled collagen mimetic peptides. Bioconjugate Chemistry,2013, 24, 9–16.

[6] Molecular level detection and localization of mechanicaldamage in collagen enabled by collagen hybridizingpeptides. Nature Communications, 2017, 8, 14913, doi:10.1038/ncomms14913.

[7] Molecular assessment of collagen denaturation indecellularized tissues using a collagen hybridizing peptide.Acta Biomaterialia, 2017, 53, 268–278.

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