钌光引发剂/ Ruthenium Photoinitiator，可见光光交联试剂盒

LAP是一种水溶性、细胞相容的光引发剂，用于水凝胶或生物墨水的聚合。由于其增加的水溶性、在365纳米光下增加的聚合速率，以及在400纳米处的吸收能力，允许使用可见光进行聚合，这种光引发剂比Irgacure 2959更适合生物应用。改进的聚合动力学使细胞包埋能够在较低的引发剂浓度和更长的波长光下进行，这已被证明可以减少引发剂毒性并增加细胞存活率。

LAP光引发剂 (405nm)，非无菌，500mg被认为是非无菌的。建议向您的细胞培养系统中添加抗生素，或进行无菌过滤。进行无菌过滤时，重新悬浮所需数量的LAP，并通过0.2微米的小按钮过滤器过滤。请在2周内使用无菌光引发剂。此产品附带500毫克的干粉。

LAP光引发剂 (405nm)，非无菌，500mg存储/稳定性：

产品装在凝胶包中运输。将产品存放在2-8°C。称量所需量的粉末进行溶解。一旦溶解后，请在2周内使用。

未溶解的干粉（非溶解的）在2-8°C下稳定存放超过1年。

艾美捷钌光引发剂/ Ruthenium Photoinitiator（ABM-5248-1KIT）：

钌可见光光交联套件非常适合组织工程、细胞培养和生物打印，这些应用中需要调节基质的机械性能。该套件提供的光引发剂足够用于>200毫升的生物墨水/水凝胶（按照推荐的浓度）。

钌是一种利用可见光光交联（400-450纳米）来共价交联游离酪氨酸和丙烯酸基团的光引发剂。

钌光引发剂已在I型胶原、明胶、丝素蛋白、甲基丙烯酰化透明质酸、甲基丙烯酰化明胶、甲基丙烯酰化I型胶原和PEGDA上进行了测试。

钌是水溶性的，并且具有更好的细胞相容性和交联效率。

使用钌将可见光强度从3-100 mW/cm?增加并没有显著降低细胞存活率至90%以下。

将钌浓度增加10倍（10x）并没有降低细胞存活率至90%以下。

钌呈红色/黄色/橙色，并会改变您的溶液、水凝胶或打印构件的颜色。

这个钌可见光光交联套件被认为是非无菌的。建议向您的细胞培养系统中添加抗生素，或进行无菌过滤。进行无菌过滤时，分别重新悬浮整个体积的钌和过硫酸钠，并通过小的0.2微米按钮过滤器（分别）过滤。请在2周内使用无菌光引发剂。

钌可见光光交联套件由两个组分组成，如表1所示。

Item Catalog Number Package Size

Ruthenium Photoinitiator #5246 200 mg

Sodium Persulfate Photoinitiator #5247 1 gram

存储/稳定性：

产品在常温下运输。将套件存放在室温下。称量所需量的粉末进行溶解。一旦溶解后，请在2周内使用钌和过硫酸钠。

未溶解的干粉（非溶解的）在室温下稳定存放超过1年。

钌光引发剂使用说明：

1. 计算所需的水凝胶或生物墨水（ECM + 细胞）的体积。

2. 将所需体积乘以0.02。这是您将添加到预水凝胶溶液中的钌和过硫酸钠（每种）的数量。

3. 以37.4 mg/mL的浓度在水中或1X PBS中溶解所需的钌。

4. 以119 mg/mL的浓度在水中或1X PBS中溶解过硫酸钠。

5. 将计算出的体积（步骤2）的钌添加到您的预水凝胶溶液中，并彻底混合。

6. 将计算出的体积（步骤2）的过硫酸钠添加到您的预水凝胶溶液中，并彻底混合。

注意事项：

在添加到预水凝胶之前，不要将钌和过硫酸钠混合在一起。您会得到一个快速的氧化还原反应，它们会立即沉淀。

7. 如果需要，添加细胞。

8. 在400-450nm的波长下进行光交联。最初的建议是50 mW/cm?超过3分钟以保持形状/水凝胶保真度。您可以调整光引发剂浓度、光强度和光交联时间，以定制最终水凝胶的硬度。

附加说明：

如果使用中和的I型胶原，您可以允许胶原在37°C下聚合形成水凝胶，然后进行光交联以进一步交联并调节凝胶硬度。

如何将钌与Lifeink? 200和3D生物打印一起使用：

1. 根据推荐的协议打印Lifeink? 200，进入FRESH支撑浆料中。

2. 打印后，孵化打印物以熔化FRESH明胶支撑浆料。

3. 大约30分钟后，用温暖的细胞培养基替换熔化的明胶。

4. 例如，用移液管取出2 mL的熔化明胶，然后加入2 mL的培养基。重复此过程，直到移除明胶。

5. 准备钌和过硫酸钠的储备溶液（在上述协议中找到）。

6. 将您的Lifeink? 200结构漂浮着的培养基的总体积乘以2%，并在细胞培养基中直接添加等量的钌和过硫酸钠（在您的结构所在的相同盘子中）。

7. 使用可见光（400-450 nm）进行光交联，直到达到所需的交联。

8. 如第3步中所做的，轻轻地用新鲜培养基替换培养基。